Informacije

Kako med nije toksičan za naše epitelne ćelije?

Kako med nije toksičan za naše epitelne ćelije?


We are searching data for your request:

Forums and discussions:
Manuals and reference books:
Data from registers:
Wait the end of the search in all databases.
Upon completion, a link will appear to access the found materials.

Budući da je prezasićeni rastvor šećera, med izvlači vodu iz ćelija sa kojima dolazi u kontakt putem osmoze - ubijajući ćelije. Takođe sadrži neaktivni enzim glukoza oksidaza, koji kada se razblaži vodom aktivira, a zatim pretvara glukozu u glukonsku kiselinu i vodonik peroksid – oboje su loše vesti za ćelije.

Med takođe verovatno sadrži antibiotski protein Bee Defensin-1, što je takođe loša vest za bakterije. Još nisam istražio kako funkcioniše tako da ne znam da li utiče na naše epitelne ćelije.

Zatim neke vrste meda (manuka) sadrže metilglioksal. Oštećenje lipoproteina niske gustine glikacijom metilglioksalom uzrokuje četvorostruko povećanje aterogeneze kod dijabetičara. [1] Metilglioksal se direktno vezuje za nervne završetke i na taj način povećava hronični bol u ekstremitetima kod dijabetičke neuropatije.[2][3]

Kako je bezbedno jesti?


Promeniću svoj početni komentar u pravi odgovor.

Ljudski digestivni trakt je evoluirao kako bi nam omogućio da budemo svejedi, bezbedno konzumirajući širok spektar biljne, životinjske i mineralne hrane. Dok med može biti štetan za izložene ćelije, epitelne ćelije koje oblažu digestivni trakt nisu izložene kao endotelne ćelije koje oblažu cirkulatorni sistem. Jesti med nije isto što i ubrizgati ga u vene.

Sloj sluzi prekriva ćelije digestivnog trakta od usta do debelog creva i obezbeđuje i podmazivanje i zaštitu ćelija ispod njega. U različitim stepenima štiti od izazova kao što su kiselina, osmotski stres, mehanička oštećenja i strani mikroorganizmi. Pored toga, same ćelije su slojevite i neprestano se uklanjaju i regenerišu, tako da čak i ako sluzokoža nije 100% efikasna, oštećene ćelije će biti zamenjene prilično brzo.

Hrana brzo putuje od usta kroz jednjak do želuca, ne ostavljajući dovoljno vremena da osmotski stres ili enzimi oštete bilo šta u bilo kom značajnom stepenu. (Očigledno, ako nešto progutate izuzetno oštar poput izbeljivača, lužine ili koncentrovane kiseline, to je druga priča.)

Jednom u stomaku, hrana poput meda se razblažuje digestivnim sokovima i bilo kojom drugom hranom ili pićem koja je već prisutna – nije da je stomak potpuno prazan i kuglice meda mogu samo da stoje u direktnom kontaktu sa ćelijama tokom dužeg perioda od vreme, omogućavajući osmotska ili enzimska oštećenja. Digestivni enzimi i kisela sredina brzo napadaju proteine ​​i druge supstrate, pa čak i ako glukoza oksidaza моћи Ako se aktivira, proteaze će ga cepati na neaktivne fragmente mnogo pre nego što oštete nivoe H2O2 može da se izgradi.

Lipoprotein niske gustine (LDL) se nalazi u krvotoku, a ne u digestivnom traktu, tako da bi svaki metilglioksal prisutan u hrani morao da se aktivno transportuje u krv da bi napravio bilo kakvu štetu. Posao u radu koji ste citirali je u potpunosti obavljen in vitro, bez dokaza da se MG-posredovana glikacija kao rezultat jedenja meda zapravo javlja kod ljudi.

Čini se da je mnoga hrana koju obično jedemo opasna po naše telo na ovaj ili onaj način, ali mi smo razvili snažne mehanizme za smanjenje štete. Međutim, prilično je jasno da neke namirnice su štetno na različite načine tokom vremena, tako da još uvek moramo da umereno jedemo. Ne znam da li je med (ili neke njegove vrste) jedna od tih namirnica, tako da je potrebno više istraživanja.


Defektne epitelne barijere povezane sa dve milijarde hroničnih bolesti

Epitelne ćelije čine pokrivač većine unutrašnjih i spoljašnjih površina ljudskog tela. Ovaj zaštitni sloj deluje kao odbrana od napadača - uključujući bakterije, viruse, toksine iz životne sredine, zagađivače i alergene. Ako su barijere kože i sluzokože oštećene ili propuštaju, strani agensi kao što su bakterije mogu ući u tkivo i izazvati lokalnu, često hroničnu upalu. Ovo ima i direktne i indirektne posledice.

Hronične bolesti zbog defektnih epitelnih barijera

Cezmi Akdis, direktor Švajcarskog instituta za istraživanje alergije i astme (SIAF), koji je povezan sa Univerzitetom u Cirihu (UZH), sada je objavio sveobuhvatan rezime istraživanja o oštećenju epitelne barijere u Nature Reviews Immunology. „Hipoteza o epitelnoj barijeri predlaže da su oštećenja epitelne barijere odgovorna za do dve milijarde hroničnih, neinfektivnih bolesti“, kaže profesor Akdis. U proteklih 20 godina, samo istraživači SIAF-a objavili su više od 60 članaka o tome kako različite supstance oštećuju epitelne ćelije brojnih organa.

Porast kod alergijskih i autoimunih stanja

Hipoteza o epitelnoj barijeri pruža objašnjenje zašto se alergije i autoimune bolesti povećavaju decenijama - one su povezane sa industrijalizacijom, urbanizacijom i zapadnjačkim načinom života. Danas su mnogi ljudi izloženi širokom spektru toksina, kao što su ozon, nanočestice, mikroplastika, sredstva za čišćenje u domaćinstvu, pesticidi, enzimi, emulgatori, fina prašina, izduvni gasovi, dim cigareta i bezbroj hemikalija u vazduhu, hrani i vodi. „Pored globalnog zagrevanja i virusnih pandemija kao što je COVID-19, ove štetne supstance predstavljaju jednu od najvećih pretnji čovečanstvu“, naglašava Akdis.

Astma, Alchajmerova bolest i još mnogo toga

Lokalna oštećenja epitela na koži i mukoznim barijerama dovode do alergijskih stanja, inflamatornih poremećaja creva i celijakije. Ali poremećaji epitelne barijere takođe mogu biti povezani sa mnogim drugim bolestima koje karakterišu promene u mikrobiomu. Ili imuni sistem pogrešno napada "dobre" bakterije u zdravim telima ili cilja na patogene - tj. "loše" - napadače. U crevima, propusne epitelne barijere i mikrobna neravnoteža doprinose nastanku ili razvoju hroničnih autoimunih i metaboličkih bolesti kao što su dijabetes, gojaznost, reumatoidni artritis, multipla skleroza ili ankilozni spondilitis. Štaviše, defektne epitelne barijere su takođe povezane sa neurodegenerativnim i psihijatrijskim bolestima kao što su Parkinsonova bolest, Alchajmerova bolest, poremećaji spektra autizma i hronična depresija, koje mogu biti pokrenute ili pogoršane udaljenim inflamatornim odgovorima i promenama u mikrobiomu creva.

Prevencija, intervencija - i još istraživanja

"Postoji velika potreba da se nastavi istraživanje epitelne barijere kako bi se unapredilo naše razumevanje molekularnih mehanizama i razvili novi pristupi za prevenciju, ranu intervenciju i terapiju", kaže Akdis. Novi terapijski pristupi mogu se fokusirati na jačanje barijera specifičnih za tkivo, blokiranje bakterija ili izbegavanje kolonizacije patogena. Druge strategije za smanjenje bolesti mogu uključiti mikrobiom, na primer kroz ciljane dijetetske mere. Na kraju, ali ne i najmanje važno, fokus mora biti i na izbegavanju i smanjenju izloženosti štetnim supstancama i razvoju manje toksičnih proizvoda.


Kako med nije toksičan za naše epitelne ćelije? - Biologija

Svi članci koje je objavio MDPI odmah su dostupni širom sveta pod licencom otvorenog pristupa. Za ponovno korišćenje celog ili dela članka koji je objavio MDPI, uključujući slike i tabele, nije potrebna posebna dozvola. Za članke objavljene pod licencom Creative Common CC BY otvorenog pristupa, bilo koji deo članka može se ponovo koristiti bez dozvole pod uslovom da je originalni članak jasno citiran.

Feature Papers predstavljaju najnaprednije istraživanje sa značajnim potencijalom za veliki uticaj u ovoj oblasti. Kratki radovi se podnose na individualni poziv ili preporuku naučnih urednika i prolaze recenziranje pre objavljivanja.

Feature Paper može biti ili originalni istraživački članak, značajna nova istraživačka studija koja često uključuje nekoliko tehnika ili pristupa, ili sveobuhvatan pregledni rad sa konciznim i preciznim ažuriranjima o najnovijem napretku u ovoj oblasti koji sistematski razmatra najuzbudljivija dostignuća u nauci. književnost. Ova vrsta rada pruža pogled na buduće pravce istraživanja ili moguće primene.

Članci po izboru urednika su zasnovani na preporukama naučnih urednika MDPI časopisa iz celog sveta. Urednici biraju mali broj nedavno objavljenih članaka u časopisu za koje veruju da će biti posebno interesantni autorima, ili važni u ovoj oblasti. Cilj je da se pruži snimak nekih od najuzbudljivijih radova objavljenih u različitim istraživačkim oblastima časopisa.


Med i rak: održivi inverzni odnos posebno za zemlje u razvoju—pregled

Med i rak imaju održivu obrnutu vezu. Karcinogeneza je proces u više koraka i ima više faktora uzroka. Među njima su nizak imuni status, hronične infekcije, hronične upale, hronični čirevi koji ne zaceljuju, gojaznost i tako dalje. Sada postoje znatni dokazi da je med prirodni pojačivač imuniteta, prirodni antiinflamatorni agens, prirodni antimikrobni agens, prirodna „vakcina“ protiv raka i prirodni promoter zarastanja hroničnih čireva i rana. Iako med ima materije od kojih je najzastupljenija mešavina šećera, za koju se smatra da je kancerogena, razumljivo je da njegovo blagotvorno dejstvo antikancerogenog sredstva izaziva skeptike. Pozitivni naučni dokazi za antikancerogena svojstva meda su sve veći. Mehanizam o tome kako med ima antikancerogeno dejstvo je oblast od velikog interesovanja. Među predloženim mehanizmima su inhibicija proliferacije ćelija, indukcija apoptoze i zaustavljanje ćelijskog ciklusa. Med i rak imaju održivu obrnutu vezu u okruženju zemalja u razvoju gde su resursi za prevenciju i lečenje raka ograničeni.

1. Rak: Globalna epidemija

Rak je globalna epidemija. U 2008. godini procenjeno je da je bilo 12.332.300 slučajeva raka, od kojih je 5,4 miliona bilo u razvijenim zemljama, a 6,7 ​​miliona u zemljama u razvoju [1] (Slika 1). Preko polovine slučajeva incidenta dogodilo se kod stanovnika četiri regiona SZO. Svetska populacija je porasla sa 6,1 milijarde u 2000. na 6,7 ​​milijardi u 2008. [2]. Porast stanovništva bio je mnogo veći u zemljama u razvoju nego u razvijenim zemljama. Čak i ako starosne stope raka ostanu konstantne, zemlje u razvoju bi imale veći teret raka nego razvijene zemlje.


Trendovi raka pokazuju uzlazne trendove u mnogim zemljama u razvoju [3–5] i mešoviti obrazac u razvijenim zemljama [6–8]. Do 2050. godine, opterećenje raka bi moglo dostići 24 miliona slučajeva godišnje širom sveta, sa 17 miliona slučajeva u zemljama u razvoju [9]. Karcinomi koji su povezani sa ishranom i načinom života češće se vide u razvijenim zemljama, dok su karcinomi koji su posledica infekcija češće u zemljama u razvoju. Prema Svetskoj zdravstvenoj organizaciji (SZO), očekuje se da će smrtnost od raka porasti na 104% širom sveta do 2020.

Dok se broj ukupnih karcinoma povećava, trend određenih karcinoma se menja u razvijenim zemljama i zemljama u razvoju. U razvijenim zemljama ovaj trend opada [10] jer se infekcije mikroorganizmima smanjuju i postoje prostorije za skrining. U Singapuru je zabeleženo prosečno godišnje povećanje od 3,6% karcinoma dojke kod žena u periodu 1988–1992 [11]. U Kataru je došlo do porasta karcinoma za 57,1% 1991–2006 [12], au Holandiji je došlo do porasta između 1,9% (žene) i 3,4% (muškarci) godišnje za rak jednjaka 1989–2003 [13].

Da bismo razumeli korisnost meda u lečenju raka, moramo razumeti različite faktore koji mogu izazvati rak. Karcinogeneza je proces u više koraka i ima više faktora uzroka. Razvoj karcinoma se dešava dugo nakon što su se desili koraci iniciranja, promocije i progresije (Slika 2). Oštećenje ćelije može biti uzrokovano jednim faktorom ili višestrukim faktorima. Ovo poslednje je češće. Do razvoja raka može doći 10-15 godina nakon izlaganja faktorima rizika.


Koraci u karcinogenezi. *Koraci izmenjeni konzumacijom alkohola (Izvor: Garro et al. Alcohol Health & Research World 16(1):81–86, 1992).
1.1. Životne navike/bolesti kao rizici za razvoj raka

Rak je uzrokovan genetskim oštećenjem genoma ćelija. Ovo oštećenje je ili nasleđeno ili stečeno tokom života. Stečeno genetsko oštećenje je često „samo-naneseno“ nezdravim načinom života. U suštini, jedna trećina raka je posledica upotrebe duvana, jedna trećina zbog faktora ishrane i načina života, a jedna petina zbog infekcija. Ostali faktori uključuju hemijske karcinogene, zagađivače životne sredine i alkohol (Slika 3). U zemljama u razvoju, karcinomi uzrokovani infekcijama mikroorganizmima kao što su grlića materice (virusom humanog papiloma) [14], jetre (virusom hepatitisa) [15], nazofarinksa (od Epstein-Barr virusa) [16] i želuca (od Helicobacter pylori) [17] su češći od onih u razvijenim zemljama [18]. Dok su karcinomi prostate, dojke i kolorektuma očigledno češći u razvijenim zemljama nego u zemljama u razvoju, razlika nije baš očigledna kao kod raka pluća koji je jednako rasprostranjen kao u više ili manje razvijenim zemljama. Osim karcinoma dojke, prvih 5 slučajeva raka kod muškaraca i žena u zemljama u razvoju nastaje zbog načina života ili infekcija [18].


1.1.1. Pušenje i upotreba duvana

Povezanost raka i pušenja cigareta je van sumnje. Prevalencija pušenja je veća u zemljama u razvoju nego u razvijenim zemljama [19]. Pušenje je povezano sa nizom karcinoma kao što su larinks, bešika, dojke, jednjak i grlić materice. Dok u razvijenim zemljama prevalencija pušenja opada [20], scenario je obrnut u zemljama u razvoju. Pokretanje i uticaj na početak pušenja su slični onima u razvijenim zemljama [21]. Pušenje povećava rizik od kolorektalnih karcinoma za 43% [22]. Pušači su bili povezani sa 8,8 puta većim rizikom od kolorektalnog karcinoma (95% interval poverenja, 1,7–44,9) kada su se hranili dobro pripremljenom ishranom od crvenog mesa ako imaju brze fenotipove NAT2 i CYP1A2 [23]. Nije pronađena slična povezanost kod nikad nepušača [23].

1.1.2. Gojaznost i fizička neaktivnost

Gojazni subjekti imaju približno 1,5-3,5 puta veći rizik od razvoja karcinoma u poređenju sa subjektima normalne težine [24]. Gojaznost je povezana sa nizom karcinoma [25, 26], posebno endometrijuma [27, 28], dojke [29, 30] i kolorektalnog karcinoma [31]. Adipociti imaju sposobnost da pojačaju proliferaciju ćelija raka debelog creva in vitro [32]. Trend prevalencije prekomerne težine/gojaznosti je u porastu u mnogim razvijenim zemljama i zemljama u razvoju [33]. U studiji sprovedenoj 2005. [34] u okrugu Kota Bharu u državi Kelantan Malezija, ukupna prevalencija prekomerne težine/gojaznosti bila je 49,1% [34], što je mnogo više od brojke objavljene ranije 1996. godine [35]. U ovoj zajednici, porast raka je eksponencijalan u periodu od 2002. do 2007. godine (prirast od 143,6%) u poređenju sa prethodnim petogodišnjim periodom 1996–2001 [36].

Gojaznost nije društveni problem već bolest. Najveći rizik je za gojazne osobe koje su i dijabetičare, posebno one čiji je indeks telesne mase iznad 35 kg/m 2 . Povećanje rizika je 93 puta kod žena i 42 puta kod muškaraca [37].

1.1.3. Dijabetes, posebno tip 2, kao rizik za razvoj raka

Gojaznost je usko povezana sa dijabetesom [38]. Zajednica koja ima visoku prevalenciju gojaznosti takođe ima visoku prevalenciju dijabetesa [36]. U Kelantanu, Malezija, prevalencija dijabetesa 1999. godine bila je 10,5%, a poremećena tolerancija glukoze 16,5% [39]. Kelantan je rangiran sa najvišim nivoom prevalencije dijabetesa u Maleziji u kojoj je ukupna nacionalna prevalencija 8,3% [40], tako da nije bilo iznenađenje videti brz porast prevalencije raka u državi [36]. Prema pregledu dijabetesa, SZO je procenila da će do 2030. godine u Maleziji biti 2,48 miliona dijabetičara, što je skok od 164% sa 0,94 miliona u 2002. godini [41]. Jedan od najčešćih karcinoma primećenih u zajednici koja ima visok stepen dijabetičara i gojaznosti je kolorektalni karcinom [42–45].

U studiji od 138 kolorektalnih karcinoma (CRC) u bolnici Universiti Sains Malezija, 47,8% je imalo metaboličke bolesti, od kojih je 13,8% bilo dijabetes tipa 2 [42]. Oni dijabetičari sa CRC često imaju distalne karcinome [42].

1.2. Hronične infekcije kao rizik za razvoj raka

Postoji veliki broj mikroorganizama koji mogu izazvati rak. Uobičajeni virusi koji izazivaju kancere [46] su Epstein-Barr virus (EBV) [47] (karcinomi nazofarinksa), humani papiloma virus (rak grlića materice i drugi skvamozni karcinomi) i virusi hepatitisa B (karcinom jetre). Virusi su onkogeni nakon dugog perioda latencije [48].

Bakterije za koje je proučavano da imaju veze sa rakom su Helicobacter pylori infekcije (rak želuca) [17], Ureaplasma urealyticum (rak prostate) [49] i hronični nosilac tifusa (rak žučne kese) [50]. Takođe je proučavano da su hronične gljivične infekcije povezane sa rakom [51]. Paraziti kao npr Schistosoma hematobium povezani su sa karcinomom metilja jetre mokraćne bešike Opisthorchis viverrini и Clonorchis sinensis povezan sa holangiokarcinomom i hepatocelularnim karcinomom. Postoje tri glavna mehanizma pomoću kojih infekcije mogu izazvati rak. Čini se da oni uključuju inicijaciju kao i promociju karcinogeneze [52]. Perzistentna infekcija unutar domaćina izaziva hroničnu upalu praćenu formiranjem reaktivnih vrsta kiseonika i azota (ROS i RNOS) [52]. ROS i RNOS imaju potencijal da oštete DNK, proteine ​​i ćelijske membrane. Hronična upala često dovodi do ponovljenih ciklusa oštećenja ćelija što dovodi do abnormalne proliferacije ćelija [53]. Oštećenje DNK podstiče rast malignih ćelija. Drugo, infektivni agensi mogu direktno transformisati ćelije, umetanjem aktivnih onkogena u genom domaćina, inhibiranjem tumorskih supresora ili stimulacijom mitoze [52].Treće, infektivni agensi, kao što je virus humane imunodeficijencije (HIV), mogu izazvati imunosupresiju [52].

2. Nizak imunološki status kao rizik od razvoja raka

2.1. Rak i starenje

Najvažnija promena koja bi se desila u svetskoj populaciji u narednih 50 godina je promena u procentu starijih ljudi (više od 65 godina): 7% 2000. do 16% 2050. godine [54]. Mnogi kanceri su povezani sa starenjem. Iako starost sama po sebi nije važna determinanta rizika od raka, ona podrazumeva produženo izlaganje kancerogenu [55]. Do 2050. godine predviđa se da će 27 miliona ljudi imati rak. Više od polovine procenjenog broja biće stanovnici zemalja u razvoju [54]. Starenje je takođe povezano sa smanjenim imunološkim sistemom.

2.2. Nizak imunološki status zbog hroničnih bolesti

Pacijenti koji imaju nizak imuni sistem su u opasnosti od razvoja raka. Ovo objašnjava zašto su dijabetičari više izloženi riziku od raka epitela od nedijabetičara. Pacijenti sa HIV-om su u opasnosti da razviju epitelni i neepitelni karcinom. Ove osobe su takođe izložene riziku od razvoja višestrukih hroničnih infekcija, što implicira višestruku nastanak raka. Pacijenti sa autoimunim bolestima takođe su u opasnosti da razviju karcinome kao što su kolorektalni karcinomi kod ulceroznog kolitisa i Kronova bolest i rak štitne žlezde kod autoimunog tiroiditisa.

2.3. Hronični čirevi i rane

Hronični čirevi imaju rizik od razvoja raka. Najčešći je Marjolinov čir [56], a česti su u zemljama u razvoju, posebno u ruralnim područjima sa lošim životnim uslovima [57]. Ovaj faktor rizika je povezan sa hroničnim infekcijama jer većina, ako ne i svi hronični čirevi, ne zarastaju zbog upornih infekcija.

3. Šta je med i zašto je koristan protiv raka? (Pogledajte sliku 4)


Med je vekovima poznat po svojim lekovitim svojstvima i svojstvima koja promovišu zdravlje. Sadrži različite vrste fitokemikalija sa visokim sadržajem fenola i flavonoida koji doprinose njegovoj visokoj antioksidativnoj aktivnosti [58–60]. Sredstvo koje ima jaka antioksidativna svojstva može imati potencijal da spreči razvoj kancera jer slobodni radikali i oksidativni stres igraju značajnu ulogu u izazivanju nastanka kancera [61]. Fitokemikalije dostupne u medu mogu se suziti na fenolne kiseline i polifenole. Prijavljeno je da varijante polifenola u medu imaju antiproliferativno svojstvo protiv nekoliko vrsta raka [62].

4. Med kao prirodni pojačivač imuniteta

Med stimuliše proizvodnju inflamatornih citokina iz monocita [63]. Utvrđeno je da manuka, pašnjak i med od želea značajno povećavaju TNF-α, IL-1βi oslobađanje IL-6 iz ćelija MM6 (i ljudskih monocita) u poređenju sa netretiranim i veštačkim ćelijama tretiranim medom (

) [63]. Utvrđeno je da komponenta manuka meda od 5,8 kDa stimuliše proizvodnju citokina iz imunih ćelija preko TLR4 [64]. Med stimuliše proizvodnju antitela tokom primarnih i sekundarnih imunih odgovora protiv antigena zavisnih i timus nezavisnih kod miševa kojima su ubrizgana ovčija crvena krvna zrnca i E. coli antigen [65]. Konzumacija 80 g prirodnog meda dnevno tokom 21 dana pokazala je da je nivo prostaglandina u poređenju sa normalnim ispitanicima povišen kod pacijenata sa AIDS-om [66]. Pokazalo se da prirodni med smanjuje nivo prostaglandina, povećanu proizvodnju NO kod pacijenata sa dugom istorijom AIDS-a [66]. Prijavljeno je da oralno uzimanje meda povećava proizvodnju antitela u primarnim i sekundarnim imunskim odgovorima na antigene zavisne i timus nezavisne [67].

Ove studije sugerišu da svakodnevna konzumacija meda poboljšava nečiji imuni sistem.

5. Med kao prirodni antiinflamatorni agens

U rutinskom svakodnevnom životu, naše ćelije mogu biti povređene iritantima spolja ili unutar našeg tela (mikrobi ili nemikrobi). Ćelijske/molekularne povrede rezultiraju inflamatornim odgovorom, odbrambenim mehanizmima tela u pokušaju da se otarase iritansa. Uopšteno govoreći, inflamatorne reakcije su korisne i zaštitne za nas, ali ponekad su zapaljenske reakcije štetne po zdravlje. Med je snažno antiinflamatorno sredstvo. Deca koja pate od pelenskog dermatitisa značajno su se poboljšala nakon lokalne primene mešavine koja sadrži med, maslinovo ulje i pčelinji vosak nakon 7 dana [68]. Med pruža značajno ublažavanje simptoma kašlja kod dece sa infekcijom gornjih disajnih puteva (URTI) [69]. Pokazalo se da je efikasan u lečenju dermatitisa i Psoriasis vulgaris [70]. Osam od 10 pacijenata sa dermatitisom i pet od osam pacijenata sa psorijazom pokazalo je značajno poboljšanje nakon 2 nedelje na masti na bazi meda [70]. Med u razblaženjima do 1 : 8 smanjio je adherenciju bakterija sa 25,6 ± 6,5 (kontrola) na 6,7 ​​± 3,3 bakterije po epitelnoj ćeliji ( ) in vitro [71]. Volonteri koji su žvakali „medenu kožu“ pokazali su da je došlo do statistički značajnog smanjenja srednjih rezultata plaka (0,99 smanjen na 0,65

) u grupi sa medom od manuke u poređenju sa kontrolnom grupom, što ukazuje na potencijalnu terapeutsku ulogu meda za gingivitis, parodontalnu bolest [72], čireve u ustima i druge probleme oralnog zdravlja [73].

Izveštaj o slučaju pacijenta koji je 20 godina imao hroničnu distrofičnu bulozu epidermolize (EB) izlečio se medom impregniranim zavojom za 15 nedelja [74] nakon što su konvencionalni zavoji i kreme bili neuspešni. Ovo ilustruje korisnost meda kao antiinflamatornog sredstva. Hronični inflamatorni proces ima rizik od razvoja raka.

6. Med kao prirodni antimikrobni lekovi

Svakodnevno smo izloženi svim vrstama mikrobnih uvreda od bakterija, virusa, parazita i gljivica. Med je moćno prirodno antimikrobno sredstvo. Najčešće infekcije koje ljudi dobijaju su stafilokokne infekcije. Antibakterijski efekat meda je detaljno proučavan. Baktericidni mehanizam je preko poremećaja u mašinama za deobu ćelija [75]. Minimalna inhibitorna koncentracija (MIC) za Staphylococcus aureus од стране A. mellifera med se kretao od 126,23 do 185,70 mgml-1 [76]. Med je takođe efikasan protiv koagulazno negativnih stafilokoka [77]. Lokalna primena sirovog meda na inficirane rane smanjila je znake akutnog zapaljenja [78] i tako ublažila simptome. Antimikrobna aktivnost meda je jača u kiselim sredinama nego u neutralnim ili alkalnim [78]. Potentnost meda je uporediva sa nekim lokalnim antibioticima. Primena meda kod infektivnog konjunktivitisa smanjila je crvenilo, otok, ispuštanje gnoja i vreme za eradikaciju bakterijskih infekcija [78]. Kada se med koristi zajedno sa antibioticima, gentamicinom, pojačava anti-Staphylococcus aureus aktivnost, za 22% [79]. Kada se med doda u medijum za kulturu bakterija, odlaže se pojava mikrobnog rasta na pločama za kulturu [80]. Mikobakterije nisu rasle u medijumima koji sadrže 10% i 20% meda, dok su rasli u medijumima koji sadrže 5%, 2,5% i 1% meda, što sugeriše da bi med mogao biti idealan antimikobakterijski agens [81] u određenim koncentracijama.

Med je takođe efikasan u ubijanju otpornih bakterija kao npr Pseudomonas aeruginosa (PA) i može dovesti do novog pristupa u lečenju refraktornog hroničnog rinosinusitisa [82]. Svakodnevna konzumacija meda smanjuje rizik od hroničnih infekcija mikroorganizmima. Hronične infekcije imaju rizik od razvoja raka.

Postoje tri glavna mehanizma pomoću kojih infekcije mogu izazvati rak. Čini se da oni uključuju inicijaciju kao i promociju karcinogeneze [52]. Perzistentna infekcija unutar domaćina izaziva hroničnu upalu praćenu formiranjem reaktivnih vrsta kiseonika i azota (ROS i RNOS) [52]. ROS i RNOS imaju potencijal da oštete DNK, proteine ​​i ćelijske membrane. Hronična upala često dovodi do ponovljenih ciklusa oštećenja ćelija što dovodi do abnormalne proliferacije ćelija [53]. Oštećenje DNK podstiče rast malignih ćelija. Drugo, infektivni agensi mogu direktno transformisati ćelije, umetanjem aktivnih onkogena u genom domaćina, inhibirajući tumorske supresore [52]. Treće, infektivni agensi, kao što je virus humane imunodeficijencije (HIV), mogu izazvati imunosupresiju [52].

Efikasnost meda je najbolja kada se koristi na sobnoj temperaturi. Zagrevanje meda na 80 stepeni tokom 1 sata smanjilo je antimikrobnu aktivnost i novog i uskladištenog meda. Čuvanje meda tokom 5 godina smanjilo je njegovu antimikrobnu aktivnost, dok je izlaganje ultraljubičastom zračenju povećalo njegovu aktivnost protiv nekih mikroorganizama [78].

Takođe se pokazalo da med ima antivirusna svojstva. U komparativnoj studiji utvrđeno je da je lokalna primena meda bolja od lečenja aciklovirom kod pacijenata sa rekurentnim herpetičnim lezijama [83]. Dva slučaja labijalnog herpesa i jedan slučaj genitalnog herpesa potpuno su povučeni upotrebom meda, dok nijedan slučaj tretmana aciklovirom [83].

7. Med kao mogući agens za kontrolu gojaznosti

Gojazne osobe su u opasnosti od razvoja raka. Postoji bliska veza između gojaznosti, stanja hronične upale niskog nivoa i oksidativnog stresa [84]. Gojazni subjekti imaju približno 1,5-3,5 puta veći rizik od razvoja karcinoma u poređenju sa ispitanicima normalne težine [24-26], posebno endometrijuma [27, 28], dojke [29, 30] i kolorektalnog karcinoma [31]. Adipociti imaju sposobnost da pojačaju proliferaciju ćelija raka debelog creva in vitro [32]. Najveći rizik je za gojazne osobe koje su i dijabetičare, posebno one čiji je indeks telesne mase iznad 35 kg/m 2 . Povećanje rizika je 93 puta kod žena i 42 puta kod muškaraca [37]. Jedan od najčešćih karcinoma primećenih u zajednici koja ima visok stepen dijabetičara i gojaznosti je kolorektalni karcinom [42–45].

U kliničkoj studiji na 55 pacijenata sa prekomernom težinom ili gojaznošću, kontrolna grupa (17 ispitanika) je primala 70 g saharoze dnevno tokom najviše 30 dana, a pacijenti u eksperimentalnoj grupi (38 ispitanika) su primali 70 g prirodnog meda u istom periodu. . Rezultati su pokazali da je med prouzrokovao blago smanjenje telesne težine (1,3%) i telesne masti (1,1%) [85]. Do sada nije dobro utvrđeno blagotvorno dejstvo meda na gojaznost.

8. Med kao "fiksator" za hronične čireve i rane

Sve veći broj bakterija otpornih na antibiotike učinio je da jednostavne rane postanu hronične i ne zarastaju i kao takav med pruža alternativne mogućnosti lečenja [86]. Med apsorbuje eksudate koji se oslobađaju u ranama i devitalizovanom tkivu [87]. Med je efikasan kod neposlušnih hirurških rana [88]. Povećava brzinu zarastanja stimulacijom angiogeneze, granulacije i epitelizacije, čineći presađivanje kože nepotrebnim i daje odlične kozmetičke rezultate [89]. U randomizovanom kontrolnom ispitivanju, Manuka med je poboljšao zarastanje rana kod pacijenata sa neravnim venskim ulkusima nogu [90]. Pokazalo se da med iskorenjuje MRSA (otporan na metilen Staphylococcus aureus) infekcija u 70% hroničnih venskih ulkusa [91]. Med je kisel, a hronične rane koje ne zaceljuju imaju povišenu alkalnu sredinu. Oblozi od manuka meda su povezani sa statistički značajnim smanjenjem pH vrednosti rane [92]. Dostupni dokazi u studijama meta-analize ukazuju na značajno veću efikasnost meda u poređenju sa alternativnim zavojima za površinske ili delimične opekotine [93]. Med je jeftina vlažna obloga sa antibakterijskim svojstvima i svojstvima zarastanja tkiva pogodna za dijabetičko stopalo [94]. Prosečna cena lečenja po pacijentu korišćenjem preliva od meda je mnogo jeftinija kod konvencionalnog zavoja [95].

9. Med kao prirodna vakcina protiv raka

Sintetičke vakcine poput BCG ili poliomijelitis vakcine deluju tako što sprečavaju vakcinisane subjekte da se zaraze tuberkulozom i poliomijelitisom. Med ima element „prirodne vakcine protiv raka“ jer može smanjiti hronične upalne procese, poboljšati imuni status, smanjiti infekcije otpornim organizmima i tako dalje. Neki jednostavni i polifenoli koji se nalaze u medu, naime, kafeinska kiselina (CA), fenil estri kafeinske kiseline (CAPE), krizin (CR), galangin (GA), kvercetin (QU), kemferol (KP), akacetin (AC), pinocembrin (PC), pinobanksin (PB) i apigenin (AP), evoluirali su kao obećavajući farmakološki agensi u prevenciji i lečenju raka [62]. Antioksidativna aktivnost Trigona carbonaria med iz Australije je visok na 233,96±50,95 mikroM Trolox ekvivalenata [96]. Antioksidativna aktivnost četiri uzorka meda iz različitih cvetnih izvora pokazala je visoka antioksidativna svojstva testirana različitim esejskim metodama [97]. Tamni med je imao više fenolnih jedinjenja i antioksidativnu aktivnost od bistrog meda [98]. Sastav aminokiselina meda je pokazatelj kapaciteta uklanjanja toksičnih radikala [99].

10. Med kao potencijalna upotreba u "terapiji raka"

Med može biti osnova za razvoj novih terapija za pacijente sa rakom i tumorima povezanim sa rakom. Pokazalo se da fragmenti meda iz džungle imaju hemotaktičku indukciju za neutrofile i reaktivne vrste kiseonika (ROS), što je dokazalo njegovu antitumorsku aktivnost [67]. Nedavne studije na ćelijskim linijama raka dojke [100], grlića materice [100], oralne [101] i osteosarkoma [101] koje su koristile med iz malezijske džungle pokazale su značajnu antikancerogenu aktivnost. Pokazano je da med ima antineoplastičnu aktivnost u eksperimentalnom modelu bešike in vivo i in vitro [102].

Med je bogat flavonoidima [62, 103]. Flavanoidi su izazvali veliko interesovanje među istraživačima zbog svojih antikancerogenih svojstava. Predloženi mehanizmi su prilično različiti, kao što su različiti signalni putevi [104], uključujući stimulaciju oslobađanja TNF-alfa (faktor nekroze tumora-alfa) [105], inhibiciju proliferacije ćelije, indukciju apoptoze [106] i zaustavljanje ćelijskog ciklusa [ 107] kao i inhibiciju oksidacije lipoproteina [108]. Smatra se da med posreduje u ovim korisnim efektima zbog svojih glavnih komponenti kao što su krizin [104] i drugi flavonoidi [109]. Ove razlike su objašnjive jer med ima različite cvetne izvore, a svaki cvetni izvor može da pokazuje različita aktivna jedinjenja. Iako med ima i druge supstance od kojih su najprevladavajuća mešavina šećera (fruktoza, glukoza, maltoza i saharoza) [110] koja je sama po sebi kancerogena [111], razumljivo je da njegovo blagotvorno dejstvo na rak izaziva skeptike. Mehanizam o tome kako med ima antikancerogeno dejstvo je oblast od velikog interesovanja u poslednje vreme. Efekti meda na hormonski zavisne karcinome kao što su rak dojke, endometrijuma i prostate i tumori ostaju uglavnom nepoznati. Mnogo toga možemo naučiti od prirode [112]. Na primer, proučavane su fitokemikalije, kao što su genistein, likopen, kurkumin, epigalokatehin-galat i resveratrol za lečenje raka prostate [113]. Fitoestrogeni čine grupu izoflavona i flavonoida biljnog porekla, a med spada u biljne fitoestrogene [112, 114].

11. Zaključak

Sada postoje znatni dokazi da je med prirodni pojačivač imuniteta, prirodni antiinflamatorni agens, prirodni antimikrobni agens, prirodna „vakcina“ protiv raka i prirodni promoter za lečenje hroničnih čireva i rana nekih od faktora rizika za razvoj raka. Uzgoj pčela je unosan posao. Med i rak imaju održivu obrnutu vezu u okruženju zemalja u razvoju gde su resursi za prevenciju i lečenje raka ograničeni.

Референце

  1. M. Garcia, A. Jemal, E. Ward et al., Globalne činjenice o raku & brojke 2007, Američko društvo za borbu protiv raka, Atlanta, Džordžija, SAD, 2007.
  2. P. Boyle i B. Levin, Svetski izveštaj o raku, WHO-IARC, 2008.
  3. G. C. Lim, „Pregled raka u Maleziji“, Japanski časopis za kliničku onkologiju, vol. 32, str. S37–S42, 2002. Pogled na: Google Scholar
  4. B. B. Yeole, „Trendovi incidencije raka kod ženskih dojke, grlića materice, tela materice i jajnika u Indiji“, Asian Pacific Journal of Cancer Prevention, vol. 9, br. 1, str. 119–122, 2008. Pogledati na: Google Scholar
  5. C. Lepage, L. Remontet, G. Launoy et al., “Trendovi incidence karcinoma digestivnog sistema u Francuskoj,” Evropski časopis za prevenciju raka, vol. 17, br. 1, str. 13–17, 2008. Pogledati na: Sajt izdavača | Google akademik
  6. S. Westlake i N. Cooper, „Učestalost i smrtnost od raka: trendovi u Ujedinjenom Kraljevstvu i državama članicama, 1993. do 2004.“, Zdravstvena statistika Quarterly, не. 38, str. 33–46, 2008. Pogled na: Google Scholar
  7. C. Bouchardy, G. Fioretta, E. Rapiti et al., “Nedavni trendovi u smrtnosti od raka prostate pokazuju kontinuirano smanjenje u nekoliko zemalja,” Međunarodni časopis za rak, vol. 123, br. 2, str. 421–429, 2008. Pogled na: Sajt izdavača | Google akademik
  8. Z. Kabir i L. Clancy, „Stope smrtnosti od raka u Irskoj u vezi sa životnim stilom: smanjenje ili povećanje?“ Irski medicinski časopis, vol. 99, br. 2, str. 40–42, 2006. Pogled na: Google Scholar
  9. D. M. Parkin, F. I. Bray i S. S. Devesa, „Teret raka u 2000. godini. Globalna slika“, Evropski časopis za rak, vol. 37, dodatak 8, str. S4–S66, 2001. Pogled na: Google Scholar
  10. D. Belpomme, P. Irigaray, A. J. Sasco et al., „Rasta učestalost raka: uloga načina života i otkrivanje skrininga (pregled)“ Međunarodni časopis za onkologiju, vol. 30, br. 5, str. 1037–1049, 2007. Pogledati na: Google Scholar
  11. A. Seow, S. W. Duffy, M. A. McGee, J. Lee i H. P. Lee, “Rak dojke u Singapuru: trendovi incidencije 1968�,” Međunarodni časopis za epidemiologiju, vol. 25, br. 1, str. 40–45, 1996. Pogled na: Sajt izdavača | Google akademik
  12. A. Bener, H. Ayub, R. Kakil i W. Ibrahim, „Obrasci incidencije raka među stanovništvom Katara: komparativna studija širom sveta“, Asian Pacific Journal of Cancer Prevention, vol. 9, br. 1, str. 19–24, 2008. Pogled na: Google Scholar
  13. L. M. Crane, M. Schaapveld, O. Visser, M. W. Louwman, J. T. Plukker i G. M. van Dam, „Rak jednjaka u Holandiji: povećanje incidencije i mortaliteta, ali poboljšanje preživljavanja“, Evropski časopis za rak, vol. 43, br. 9, str. 1445–1451, 2007. Pogledati na: Sajt izdavača | Google akademik
  14. D. M. Parkin, M. Almonte, L. Bruni, G. Clifford, M. P. Curado, i M. Pi༞ros, “Teret i trendovi tip-specifičnih infekcija humanim papiloma virusom i srodnih bolesti u regionu Latinske Amerike i Kariba,” Vakcina, vol. 26, dodatak 11, str. L1–L15, 2008. Pogled na: Sajt izdavača | Google akademik
  15. M.F. Yuen, J.L. Hou i A.Chutaputti, "Hepatocelularni karcinom u azijsko-pacifičkom regionu," Časopis za gastroenterologiju i hepatologiju, vol. 24, br. 3, str. 346–353, 2009. Pogled na: Sajt izdavača | Google akademik
  16. J. Chou, Y. C. Lin, J. Kim et al., “Nazofaringealni karcinom— pregled molekularnih mehanizama tumorigeneze,” Glava i vrat, vol. 30, br. 7, str. 946–963, 2008. Pogledati na: Sajt izdavača | Google akademik
  17. H. Kuniyasu, Y. Kitadai, H. Mieno i W. Yasui, “Helicobactor pylori infekcija je usko povezana sa smanjenjem telomera u želudačnoj sluzokoži,” Oncology, vol. 65, br. 3, str. 275–282, 2003. Pogled na: Sajt izdavača | Google akademik
  18. DCP2, „Kontrola raka u zemljama u razvoju, strategije prevencije i lečenja zaslužuju dalju studiju“, 2007, http://www.dcp2.org/. Pogledajte na: Google akademik
  19. C. K. Toh, „Promena epidemiologije raka pluća“, Metode u molekularnoj biologiji, vol. 472, str. 397–411, 2009. Pogledati na: Sajt izdavača | Google akademik
  20. H. A. Lando, B. Borrelli, L. C. Klein et al., „Pejzaž u globalnom istraživanju kontrole duvana: vodič za sticanje uporišta“, Američki časopis za javno zdravlje, vol. 95, br. 6, str. 939–945, 2005. Pogledati na: Sajt izdavača | Google akademik
  21. C. W. Warren, N. R. Jones, A. Peruga et al., „Globalni nadzor nad pušenjem duvana među mladima, 2000�,” MMWR Surveillance Rezime, vol. 57, br. 1, str. 1–28, 2008. Pogled na: Google Scholar
  22. R. Huxley, „Uloga faktora rizika u načinu života na smrtnost od kolorektalnog karcinoma u populaciji azijsko-pacifičkog regiona,“ Asian Pacific Journal of Cancer Prevention, vol. 8, br. 2, str. 191–198, 2007. Pogledati na: Google Scholar
  23. L. Le Marchand, J. H. Hankin, L. R. Wilkens et al., „Kombinovani efekti dobro pečenog crvenog mesa, pušenja i brzih fenotipova N-acetiltransferaze 2 i CYP1A2 u povećanju rizika od raka debelog creva,” Epidemiologija raka Biomarkeri i prevencija, vol. 10, br. 12, str. 1259–1266, 2001. Pogled na: Google Scholar
  24. T. Pischon, U. Nothlings i H. Boeing, „Gojaznost i rak“, Zbornik radova Društva za ishranu, vol. 67, br. 2, str. 128–145, 2008. Pogledati na: Sajt izdavača | Google akademik
  25. K. Rapp, J. Klenk, H. Ulmer et al., „Promena težine i rizik od raka u kohorti od više od 65.000 odraslih u Austriji,“ Annals of Oncology, vol. 19, br. 4, str. 641–648, 2008. Pogled na: Sajt izdavača | Google akademik
  26. G. K. Reeves, K. Pirie, V. Beral, J. Green, E. Spencer i D. Bull, „Učestalost raka i mortalitet u odnosu na indeks telesne mase u Million Women Study: kohortna studija“, British Medical Journal, vol. 335, br. 7630, str. 1134, 2007. Pogledaj na: Sajt izdavača | Google akademik
  27. T. Bjorge, A. Engeland, S. Tretli i E. Weiderpass, „Veličina tela u odnosu na rak uterusa u 1 milion norveških žena,“ Međunarodni časopis za rak, vol. 120, br. 2, str. 378–383, 2007. Pogled na: Sajt izdavača | Google akademik
  28. C.K. McCourt, D.G. Mutch, R.K. Gibb et al., "Indeks telesne mase: odnos prema kliničkoj, patološkoj i karakteristikama mikrosatelitne nestabilnosti kod raka endometrijuma", Gynecologic Oncology, vol. 104, br. 3, str. 535–539, 2007. Pogled na: Sajt izdavača | Google akademik
  29. S. Dogan, X. Hu, Y. Zhang, NJ Maihle, JP Grande i MP Cleary, „Efekti ishrane sa visokim sadržajem masti i/ili telesne težine na leptin tumora dojke i signalne puteve apoptoze kod MMTV-TGF-alfa miševa, ” Istraživanje raka dojke, vol. 9, br. 6, str. R91, 2007. Pogledati na: Google Scholar
  30. J. Ahn, A. Schatzkin, J. V. Lacey Jr. et al., "Debelost, promena telesne težine odraslih i rizik od raka dojke u postmenopauzi", Arhiv za internu medicinu, vol. 167, br. 19, str. 2091–2102, 2007. Pogled na: Sajt izdavača | Google akademik
  31. A. A. Moghaddam, M. Woodward i R. Huxley, “Gojaznost i rizik od kolorektalnog karcinoma: meta-analiza 31 studije sa 70.000 događaja,” Epidemiologija raka Biomarkeri i prevencija, vol. 16, br. 12, str. 2533–2547, 2007. Pogledati na: Sajt izdavača | Google akademik
  32. S. Amemori, A. Ootani, S. Aoki et al., „Adipociti i preadipociti promovišu proliferaciju ćelija raka debelog creva in vitro,” Američki časopis za fiziologiju, vol. 292, br. 3, str. G923–G929, 2007. Pogled na: Sajt izdavača | Google akademik
  33. S. Low, M. C. Chin i M. Deurenberg-Yap, “Pregled o epidemiji gojaznosti”, Anali Medicinske akademije, Singapur, vol. 38, br. 1, str. 57–65, 2009. Pogled na: Google Scholar
  34. S. M. Nazri, M. K. Imran, I. M. Ismail i A. A. Faris, „Prevalencija prekomerne težine i hroničnih bolesti koje su sami prijavili među stanovnicima Pulau Kundura, Kelantan, Malezija,“ Časopis za tropsku medicinu i javno zdravlje jugoistočne Azije, vol. 39, br. 1, str. 162–167, 2008. Pogledati na: Google Scholar
  35. A. Jackson, C. Cole, J. Esquiro i M. Edwards, “Gojaznost kod pacijenata primarne zdravstvene zaštite u Kelantanu, Malezija: prevalencija, i znanje i stavovi pacijenata,” Časopis za tropsku medicinu i javno zdravlje jugoistočne Azije, vol. 27, br. 4, str. 776–779, 1996. Pogled na: Google Scholar
  36. N. H. Othman, Z. M. Nor i B. M. Biswal, „Da li se Kelantan pridružuje globalnoj epidemiji raka?—Iskustvo bolnice Universiti Sains Malaysia 1987�,” Asian Pacific Journal of Cancer Prevention, vol. 9, br. 3, str. 473–478, 2008. Pogledati na: Google Scholar
  37. R. T. Jung, „Gojaznost kao bolest“, Britanski medicinski bilten, vol. 53, br. 2, str. 307–321, 1997. Pogled na: Google Scholar
  38. A. Grandone, A. Amato, C. Luongo, N. Santoro, L. Perrone i E. M. del Giudice, „Visoki normalni nivoi glukoze natašte su povezani sa povećanom prevalencijom poremećene tolerancije glukoze kod gojazne dece,“ Journal of Endocrinological Investigation, vol. 31, br. 12, str. 1098–1102, 2008. Pogledati na: Google Scholar
  39. M. Mafauzy, N. Mokhtar, W. B. Wan Mohamad i M. Musalmah, „Dijabetes melitus i povezani kardiovaskularni faktori rizika u severoistočnoj Maleziji“, Azijsko-pacifički časopis za javno zdravlje, vol. 11, br. 1, str. 16–19, 1999. Pogled na: Google Scholar
  40. A. Zaini, „Gde je Malezija usred azijske epidemije dijabetes melitusa?“ Istraživanje i klinička praksa dijabetesa, vol. 50, dodatak 2, str. S23–S28, 2000. Pogledati na: Sajt izdavača | Google akademik
  41. M. Mafauzy, „Dijabetes melitus u Maleziji“, Medicinski časopis Malezije, vol. 61, br. 4, str. 397–398, 2006. Pogledati na: Google Scholar
  42. N. H. Othman i A. A. Zin, "Povezivanje kolorektalnog karcinoma sa iskustvom metaboličkih bolesti sa 138 slučajeva iz Kelantana, Malezija," Asian Pacific Journal of Cancer Prevention, vol. 9, br. 4, str. 747–751, 2008. Pogledati na: Google Scholar
  43. A. Seow, J. M. Yuan, W. P. Koh, H. P. Lee i MC Yu, „Dijabetes melitus i rizik od kolorektalnog karcinoma u Singapurskoj kineskoj zdravstvenoj studiji“, Časopis Nacionalnog instituta za rak, vol. 98, br. 2, str. 135–138, 2006. Pogledati na: Sajt izdavača | Google akademik
  44. Y. X. Yang, S. Hennessy i J. D. Lewis, „Dijabetes melitus tipa 2 i rizik od kolorektalnog karcinoma“, Klinička gastroenterologija i hepatologija, vol. 3, br. 6, str. 587–594, 2005. Pogledati na: Sajt izdavača | Google akademik
  45. R. L. Ahmed, K. H. Schmitz, K. E. Anderson, W. D. Rosamond i A. R. Folsom, "Metabolički sindrom i rizik od incidentnog kolorektalnog karcinoma", Rak, vol. 107, br. 1, str. 28–36, 2006. Pogled na: Sajt izdavača | Google akademik
  46. C. Carrillo-Infante, G. Abbadessa, L. Bagella i A. Giordano, “Virusne infekcije kao uzrok raka (pregled)” Međunarodni časopis za onkologiju, vol. 30, br. 6, str. 1521–1528, 2007. Pogledati na: Google Scholar
  47. K. Siddique, S. Bhandari i G. Harinath, “Epsteln-Barr virus (EBV) positie analni B ćelijski limfom: prikaz slučaja i pregled literature,” Anali Kraljevskog koledža hirurga Engleske, vol. 92, br. 3, str. W7–W9, 2010. Pogledati na: Sajt izdavača | Google akademik
  48. M. E. McLaughlin-Drubin i K. Munger, „Virusi povezani sa ljudskim rakom“, Biochimica et Biophysica Acta, vol. 1782, br. 3, str. 127–150, 2008. Pogled na: Sajt izdavača | Google akademik
  49. J. Hrbacek, M. Urban, E. Hamsikova et al., “Serumska antitela protiv genitourinarnih infektivnih agenasa kod pacijenata sa karcinomom prostate i benignom hiperplazijom prostate: studija slučaj-kontrola,” BMC Cancer, vol. 11, član 53, 2011. Pogledaj na: Sajt izdavača | Google akademik
  50. V. Sharma, V. S. Chauhan, G. Nath, A. Kumar i V. K. Shukla, "Uloga žučnih bakterija u karcinomu žučne kese", Hepato-Gastroenterology, vol. 54, br. 78, str. 1622–1625, 2007. Pogledati na: Google Scholar
  51. S. J. Hooper, M. J. Wilson i S. J. Crean, “Istraživanje veze između mikroorganizama i oralnog raka: sistematski pregled literature,” Glava i vrat, vol. 31, br. 9, str. 1228–1239, 2009. Pogledati na: Sajt izdavača | Google akademik
  52. H. Kuper, H. O. Adami i D. Trichopoulos, „Infekcije kao glavni uzročnik raka kod ljudi koji se može sprečiti“, Časopis za internu medicinu, vol. 249, br. 741, str. 61–74, 2001. Pogledati na: Sajt izdavača | Google akademik
  53. S. M. Cohen, D. T. Purtilo i L. B. Ellwein, „Ideje u patologiji. Ključna uloga povećane proliferacije ćelija u humanoj karcinogenezi, Moderna patologija, vol. 4, br. 3, str. 371–382, 1991. Pogled na: Google Scholar
  54. F. Bray i B. Moller, „Predviđanje budućeg tereta raka“, Nature Reviews Cancer, vol. 6, br. 1, str. 63–74, 2006. Pogledati na: Sajt izdavača | Google akademik
  55. S. Franceschi i C. La Vecchia, “Epidemiologija raka kod starijih osoba,” Kritički osvrti u onkologiji/hematologiji, vol. 39, br. 3, str. 219–226, 2001. Pogled na: Sajt izdavača | Google akademik
  56. M. E. Asuquo, A. M. Udosen, I. A. Ikpeme et al., „Karcinom skvamoznih ćelija u Kalabaru, Južna Nigerija,“ Klinička i eksperimentalna dermatologija, vol. 34, br. 8, str. 870–873, 2009. Pogledati na: Sajt izdavača | Google akademik
  57. M. Asuquo, G. Ugare, G. Ebughe i P. Jibril, „Marjolinov čir: značaj hirurškog lečenja hroničnih kožnih ulkusa,” Međunarodni časopis za dermatologiju, vol. 46, dodatak 2, str. 29–32, 2007. Pogledati na: Sajt izdavača | Google akademik
  58. L. Yao, N. Datta, F. A. Tomás-Barberán, F. Ferreres, I. Martos i R. Singanusong, “Flavonoidi, fenolne kiseline i abscizinska kiselina u medu od leptospermuma Australije i Novog Zelanda,” Food Chemistry, vol. 81, br. 2, str. 159–168, 2003. Pogled na: Sajt izdavača | Google akademik
  59. K. Pyrzynska i M. Biesaga, “Analiza fenolnih kiselina i flavonoida u medu,” TrAC trendovi u analitičkoj hemiji, vol. 28, br. 7, str. 893–902, 2009. Pogledati na: Sajt izdavača | Google akademik
  60. M. O. Iurlina, A. I. Saiz, R. Fritz i G. D. Manrique, „Glavni flavonoidi argentinskog meda. Optimizacija načina vađenja i analiza njihovog sadržaja u odnosu na geografski izvor meda“, Food Chemistry, vol. 115, br. 3, str. 1141–1149, 2009. Pogled na: Sajt izdavača | Google akademik
  61. M. Valko, D. Leibfritz, J. Moncol, M. T. D. Cronin, M. Mazur i J. Telser, “Slobodni radikali i antioksidansi u normalnim fiziološkim funkcijama i ljudskim bolestima”, The International Journal of Biochemistry & Cell Biology, vol. 39, br. 1, str. 44–84, 2007. Pogledati na: Sajt izdavača | Google akademik
  62. S. K. Jaganathan i M. Mandal, “Antiproliferativni efekti meda i njegovih polifenola: pregled,” Časopis za biomedicinu i biotehnologiju, vol. 2009, ID članka 830616, 13 strana, 2009. Pogledaj na: Sajt izdavača | Google akademik
  63. A. J. Tonks, R. A. Cooper, K. P. Jones, S. Blair, J. Parton i A. Tonks, “Med stimuliše proizvodnju inflamatornih citokina iz monocita,” Cytokine, vol. 21, br. 5, str. 242–247, 2003. Pogled na: Sajt izdavača | Google akademik
  64. A. J. Tonks, E. Dudley, N. G. Porter i saradnici, „Komponenta manuka meda od 5,8 kDa stimuliše imune ćelije preko TLR4,“ Časopis za biologiju leukocita, vol. 82, br. 5, str. 1147–1155, 2007. Pogledati na: Sajt izdavača | Google akademik
  65. N. S. Al-Waili i A. Haq, "Uticaj meda na proizvodnju antitela protiv timus-zavisnih i timus-nezavisnih antigena u primarnim i sekundarnim imunim odgovorima," Journal of Medicinal Food, vol. 7, br. 4, str. 491–494, 2004. Pogled na: Google Scholar
  66. N. S. Al-Waili, T. N. Al-Waili, A. N. Al-Waili i K. S. Saloom, "Uticaj prirodnog meda na biohemijske i hematološke varijable kod AIDS-a: studija slučaja", The Scientific World Journal, vol. 6, str. 1985–1989, 2006. Pogled na: Sajt izdavača | Google akademik
  67. M. Fukuda, K. Kobayashi, Y. Hirono et al., „Med iz džungle poboljšava imunološku funkciju i antitumorsku aktivnost,“ Komplementarna i alternativna medicina zasnovana na dokazima, vol. 2011, ID članka 908743, 2011. Pogledaj na: Sajt izdavača | Google akademik
  68. N. S. Al-Waili, "Kliničke i mikološke prednosti lokalne primene meda, maslinovog ulja i pčelinjeg voska kod pelenskog dermatitisa", Klinička mikrobiologija i infekcija, vol. 11, br. 2, str. 160–163, 2005. Pogled na: Sajt izdavača | Google akademik
  69. B. Heppermann, „Ka hitnoj medicini zasnovanoj na dokazima: najbolje opklade iz Kraljevske bolnice u Mančesteru. Opklada 3. Med za simptomatsko ublažavanje kašlja kod dece sa infekcijama gornjih disajnih puteva“, Časopis za hitnu medicinu, vol. 26, br. 7, str. 522–523, 2009. Pogled na: Google Scholar
  70. N. S. Al-Waili, „Topična primena mešavine prirodnog meda, pčelinjeg voska i maslinovog ulja za atopijski dermatitis ili psorijazu: delimično kontrolisana, jednoslepa studija,“ Komplementarne terapije u medicini, vol. 11, br. 4, str. 226–234, 2003. Pogled na: Sajt izdavača | Google akademik
  71. A. Alnaqdy, A. Al-Jabri, Z. Al Mahrooqi, B. Nzeako i H. Nsanze, “Efekat inhibicije meda na prianjanje salmonele na epitelne ćelije creva in vitro,” Međunarodni časopis za mikrobiologiju hrane, vol. 103, br. 3, str. 347–351, 2005. Pogled na: Sajt izdavača | Google akademik
  72. HK English, A.R. Pack i P.C. Molan, „Efekti manuka meda na plak i gingivitis: pilot studija“, Časopis Međunarodne akademije za parodontologiju, vol. 6, br. 2, str. 63–67, 2004. Pogled na: Google Scholar
  73. P.C. Molan, „Potencijal meda da promoviše oralno zdravlje“, Opšta stomatologija, vol. 49, br. 6, str. 584–589, 2001. Pogled na: Google Scholar
  74. J. Hon, „Upotreba meda za zaceljivanje hronične rane kod pacijenta sa buloznom epidermolizom“, British Journal of Nursing, vol. 14, br. 19, str. S4–S12, 2005. Pogled na: Google Scholar
  75. A. F. Henriques, R. E. Jenkins, N. F. Burton i R. A. Cooper, „Intracelularni efekti meda od manuka na Staphylococcus aureus“, Evropski časopis za kliničku mikrobiologiju i zarazne bolesti, vol. 29, br. 1, str. 45–50, 2010. Pogledati na: Sajt izdavača | Google akademik
  76. P. L. Miorin, N. C. Levy Jr., A. R. Custodio, W. A. ​​Bretz i M. C. Marcucci, "Antibakterijska aktivnost meda i propolisa iz Apis mellifera i Tetragonisca angustula protiv Staphylococcus aureus," Časopis za primenjenu mikrobiologiju, vol. 95, br. 5, str. 913–920, 2003. Pogled na: Sajt izdavača | Google akademik
  77. V. M. French, R. A. Cooper i P. C. Molan, “Antibakterijska aktivnost meda protiv koagulaza-negativnih stafilokoka,” Časopis za antimikrobnu hemoterapiju, vol. 56, br. 1, str. 228–231, 2005. Pogled na: Sajt izdavača | Google akademik
  78. N. S. Al-Waili, „Istraživanje antimikrobne aktivnosti prirodnog meda i njegovih efekata na patogene bakterijske infekcije hirurških rana i konjuktive,“ Journal of Medicinal Food, vol. 7, br. 2, str. 210–222, 2004. Pogled na: Sajt izdavača | Google akademik
  79. A. A. Al-Jabri, S. A. Al-Hosni, B. C. Nzeako, Z. H. Al-Mahrooqi i H. Nsanze, “Antibakterijska aktivnost omanskog meda samog i u kombinaciji sa gentamicinom,” Saudijski medicinski časopis, vol. 26, br. 5, str. 767–771, 2005. Pogled na: Google Scholar
  80. N. S. Al-Waili, M. Akmal, F. S. Al-Waili, K. Y. Saloom i A. Ali, "Antimikrobni potencijal meda iz Ujedinjenih Arapskih Emirata na nekim mikrobnim izolatima", Monitor medicinskih nauka, vol. 11, br. 12, str. BR433–BR438, 2005. Pogledati na: Google Scholar
  81. A. A. Asadi-Pooya, M. R. Pnjehshahin i S. Beheshti, "Antimikobakterijski efekat meda: studija in vitro", Rivista di Biologia, vol. 96, br. 3, str. 491–495, 2003. Pogled na: Google Scholar
  82. T. Alandejani, J. Marsan, W. Ferris, R. Slinger i F. Chan, “Efektivnost meda na Staphylococcus aureus i Pseudomonas aeruginosa biofilmove,” Otorinolaringologija—Hirurgija glave i vrata, vol. 141, br. 1, str. 114–118, 2009. Pogledati na: Sajt izdavača | Google akademik
  83. N. S.Al-Waili, „Topalna primena meda u odnosu na aciklovir za lečenje rekurentnih herpes simpleks lezija“, Monitor medicinskih nauka, vol. 10, br. 8, str. MT94–MT98, 2004. Pogled na: Google Scholar
  84. P. Codoner-Franch, V. Valls-Belles, A. Arilla-Codoner i E. Alonso-Iglesias, “Oksidantni mehanizmi u gojaznosti u detinjstvu: veza između upale i oksidativnog stresa”, Translational Research, vol. 158, br. 6, str. 369–384, 2011. Pogled na: Sajt izdavača | Google akademik
  85. N. Yaghoobi, N. Al-Waili, M. Ghayour-Mobarhan et al., „Efekti prirodnog meda i kardiovaskularnih faktora rizika na glukozu u krvi, holesterol, triacilglicerol, CRP i telesnu težinu u poređenju sa saharozom,“ The Scientific World Journal, vol. 8, str. 463–469, 2008. Pogled na: Sajt izdavača | Google akademik
  86. A. Sharp, „Korisni efekti zavoja od meda u zbrinjavanju rana,“ Nursing Standard, vol. 24, br. 7, str. 66–72, 2009. Pogled na: Google Scholar
  87. K.F. Cutting, „Med i savremena nega rana: pregled“, Lečenje rana od stome, vol. 53, br. 11, str. 49–54, 2007. Pogled na: Google Scholar
  88. R. A. Cooper, P. C. Molan, L. Krishnamoorthy i K. G. Harding, „Manuka med se koristio za zarastanje neposlušne hirurške rane,“ Evropski časopis za kliničku mikrobiologiju i zarazne bolesti, vol. 20, br. 10, str. 758–759, 2001. Pogled na: Sajt izdavača | Google akademik
  89. P. C. Molan, „Potencijal meda u lečenju rana i opekotina“, Američki časopis za kliničku dermatologiju, vol. 2, br. 1, str. 13–19, 2001. Pogled na: Google Scholar
  90. D. G. Armstrong, „Manuka med je poboljšao zarastanje rana kod pacijenata sa neravnim venskim čirevima na nogama,“ Medicina zasnovana na dokazima, vol. 14, br. 5, str. 148, 2009. Pogledaj na: Sajt izdavača | Google akademik
  91. G. Gethin i S. Cowman, „Bakteriološke promene u neravnim venskim ulkusima nogu lečenih manuka medom ili hidrogelom: RCT,“ Journal of Wound Care, vol. 17, br. 6, str. 241–247, 2008. Pogledati na: Google Scholar
  92. G. T. Gethin, S. Cowman i R. M. Conroy, „Uticaj zavoja od manuka meda na površinski pH hroničnih rana“, Međunarodni časopis o ranama, vol. 5, br. 2, str. 185–194, 2008. Pogledati na: Sajt izdavača | Google akademik
  93. M. Wijesinghe, M. Weatherall, K. Perrin i R. Beasley, “Med u lečenju opekotina: sistematski pregled i meta-analiza njegove efikasnosti,” Medicinski časopis Novog Zelanda, vol. 122, br. 1295, str. 47–60, 2009. Pogledati na: Google Scholar
  94. J. J. Eddy, M. D. Gideonsen i G. P. Mack, „Praktična razmatranja upotrebe meda za lokalnu upotrebu za neuropatske dijabetičke čireve stopala: pregled“, Wisconsin Medical Journal, vol. 107, br. 4, str. 187–190, 2008. Pogled na: Google Scholar
  95. R. Ingle, J. Levin i K. Polinder, “Zaceljivanje rana medom𠅊 randomizovano kontrolisano ispitivanje,” Južnoafrički medicinski časopis, vol. 96, br. 9, str. 831–835, 2006. Pogledati na: Google Scholar
  96. L. P. Oddo, T. A. Heard, A. Rodriguez-Malaver et al., "Sastav i antioksidativna aktivnost meda Trigona carbonaria iz Australije", Journal of Medicinal Food, vol. 11, br. 4, str. 789–794, 2008. Pogled na: Sajt izdavača | Google akademik
  97. A.G. Hegazi i F.K. Abd El-Hady, „Uticaj meda na supresiju peroksidacije humanih lipoproteina niske gustine (LDL) (in vitro)” Komplementarna i alternativna medicina zasnovana na dokazima, vol. 6, br. 1, str. 113–121, 2009. Pogledati na: Sajt izdavača | Google akademik
  98. L. Estevinho, A. P. Pereira, L. Moreira, L. G. Dias i E. Pereira, “Antioksidativni i antimikrobni efekti ekstrakta fenolnih jedinjenja meda iz severoistočnog Portugala,” Prehrambena i hemijska toksikologija, vol. 46, br. 12, str. 3774–3779, 2008. Pogledati na: Sajt izdavača | Google akademik
  99. A. R. Perez, M. T. Iglesias, E. Pueyo, M. Gonzalez i C. de Lorenzo, „Sastav aminokiselina i antioksidativni kapacitet španskog meda“, Časopis za poljoprivrednu i prehrambenu hemiju, vol. 55, br. 2, str. 360–365, 2007. Pogled na: Sajt izdavača | Google akademik
  100. A. N. Fauzi, M. N. Norazmi i N. S. Yaacob, „Tualang med indukuje apoptozu i remeti potencijal mitohondrijalne membrane ćelijskih linija ljudskih dojke i raka grlića materice“, Prehrambena i hemijska toksikologija, vol. 49, br. 4, str. 871–878, 2011. Pogled na: Sajt izdavača | Google akademik
  101. A. A. Ghashm, N. H. Othman, M. N. Khattak, N. M. Ismail i R. Saini, "Antiproliferativni efekat Tualang meda na ćelijske linije oralnog karcinoma skvamoznih ćelija i osteosarkoma", BMC komplementarna i alternativna medicina, vol. 10, član 49, 2010. Pogledaj na: Sajt izdavača | Google akademik
  102. T. Swellam, N. Miyanaga, M. Onozawa et al., “Antineoplastična aktivnost meda u eksperimentalnom modelu implantacije raka mokraćne bešike: studije in vivo i in vitro,” Međunarodni časopis za urologiju, vol. 10, br. 4, str. 213–219, 2003. Pogled na: Sajt izdavača | Google akademik
  103. A. M. Gomez-Caravaca, M. Gomez-Romero, D. Arraez-Roman, A. Segura-Carretero i A. Fernandez-Gutierrez, "Napredak u analizi fenolnih jedinjenja u proizvodima dobijenim od pčela", Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis, vol. 41, br. 4, str. 1220–1234, 2006. Pogledati na: Sajt izdavača | Google akademik
  104. K. J. Woo, Y. J. Jeong, J. W. Park i T. K. Kwon, "Apoptoza izazvana Chrisinom je posredovana aktivacijom kaspaze i inaktivacijom Akt u ćelijama leukemije U937", Biohemijska i biofizička istraživačka komunikacija, vol. 325, br. 4, str. 1215–1222, 2004. Pogledati na: Sajt izdavača | Google akademik
  105. A. Tonks, R. A. Cooper, A. J. Price, P. C. Molan i K. P. Jones, “Stimulacija TNF-aα oslobađanje u monocitima medom, Cytokine, vol. 14, br. 4, str. 240–242, 2001. Pogled na: Sajt izdavača | Google akademik
  106. S. K. Jaganathan i M. Mandal, "Učešće neproteinskih tiola, mitohondrijalne disfunkcije, reaktivnih vrsta kiseonika i p53 u apoptozi izazvanoj medom," Istražne nove droge, vol. 28, br. 5, str. 624–633, 2010. Pogledati na: Sajt izdavača | Google akademik
  107. E. Pichichero, R. Cicconi, M. Mattei, M. G. Muzi i A. Canini, „Bagremov med i krizin smanjuju proliferaciju ćelija melanoma kroz promene u progresiji ćelijskog ciklusa“, Međunarodni časopis za onkologiju, vol. 37, br. 4, str. 973–981, 2010. Pogledati na: Sajt izdavača | Google akademik
  108. N. Gheldof i N. J. Engeseth, „Antioksidativni kapacitet meda iz različitih cvetnih izvora zasnovan na određivanju kapaciteta apsorpcije radikala kiseonika i inhibiciji in vitro oksidacije lipoproteina u uzorcima ljudskog seruma,” Časopis za poljoprivrednu i prehrambenu hemiju, vol. 50, br. 10, str. 3050–3055, 2002. Pogledati na: Sajt izdavača | Google akademik
  109. S. K. Jaganathan, S. M. Mandal, S. K. Jana, S. Das i M. Mandal, “Studije o fenolnom profiliranju, antioksidativnoj i citotoksičnoj aktivnosti indijskog meda: in vitro evaluacija,” Istraživanje prirodnih proizvoda, vol. 24, br. 14, str. 1295–1306, 2010. Pogledati na: Sajt izdavača | Google akademik
  110. A. M. Aljadi i M. Y. Kamaruddin, „Procena sadržaja fenola i antioksidativnih kapaciteta dva malezijska cvetna meda“, Food Chemistry, vol. 85, br. 4, str. 513–518, 2004. Pogledati na: Sajt izdavača | Google akademik
  111. J. C. Heuson, N. Legros i R. Heimann, „Uticaj davanja insulina na rast karcinoma dojke izazvanog 7,12-dimetilbenz(a)antracenom kod intaktnih, ooforektomiranih i hipofizektomiranih pacova,” Истраживање рака, vol. 32, br. 2, str. 233–238, 1972. Pogled na: Google Scholar
  112. P. Moutsatsou, „Spektar fitoestrogena u prirodi: naše znanje se širi“, Hormoni, vol. 6, br. 3, str. 173–193, 2007. Pogled na: Google Scholar
  113. E. C. Von Low, F. G. Perabo, R. Siener i S. C. Muller, “Činjenice i fikcija fitoterapije za rak prostate: kritička procena pretkliničkih i kliničkih podataka,” In Vivo, vol. 21, br. 2, str. 189–204, 2007. Pogled na: Google Scholar
  114. S. S. Zaid, S. A. Sulaiman, K. N. Sirajudeen i N. H. Othman, „Efekti tualang meda na ženske reproduktivne organe, kost tibije i hormonalni profil kod pacova sa ovariektomijom i životinjski model za menopauzu,” BMC komplementarna i alternativna medicina, vol. 10, član 82, 2010. Pogledaj na: Sajt izdavača | Google akademik

Ауторско право

Autorska prava © 2012 Ni Hayati Othman. Ovo je članak otvorenog pristupa koji se distribuira pod licencom Creative Commons Attribution, koja dozvoljava neograničenu upotrebu, distribuciju i reprodukciju u bilo kom mediju, pod uslovom da je originalno delo pravilno citirano.


Ljudske ćelije prepoznaju očuvane karakteristike patogena

Mikroorganizmi povremeno probiju epitelne barikade. Tada je na urođenom i prilagodljivom imunološkom sistemu da ih prepozna i uništi, a da ne ošteti domaćina. Shodno tome, imuni sistem mora biti u stanju da razlikuje sebe od sebe. U 24. poglavlju ćemo raspravljati o tome kako to radi adaptivni imuni sistem. Urođeni imuni sistem se oslanja na prepoznavanje određenih tipova molekula koji su zajednički mnogim patogenima, ali su odsutni u domaćinu. Ovi molekuli povezani sa patogenom (tzv imunostimulansi povezani sa patogenom) stimulišu dve vrste urođenih imunih odgovora—inflamatorne reakcije (o čemu se govori u nastavku) i fagocitoza ćelija kao što su neutrofili i makrofagi. Oba ova odgovora mogu se javiti brzo, čak i ako domaćin nikada ranije nije bio izložen određenom patogenu.

The imunostimulansi povezani sa patogenom su raznih vrsta. Po tome se inicijacija prokariotskog prevoda razlikuje od inicijacije eukariotske translacije formilovani metionin, a ne običan metionin, se generalno koristi kao prva aminokiselina. Prema tome, svaki peptid koji sadrži formilmetionin na N-kraju mora biti bakterijskog porekla. Peptidi koji sadrže formilmetionin deluju kao veoma moćni hemoatraktanti za neutrofile, koji brzo migriraju ka izvoru takvih peptida i gutaju bakterije koje ih proizvode (videti sliku 16-96).

Pored toga, spoljašnja površina mnogih mikroorganizama je sastavljena od molekula koji se ne pojavljuju u njihovim višećelijskim domaćinima, a ovi molekuli takođe deluju kao imunostimulansi. Oni uključuju peptidoglikanski ćelijski zid i flagele bakterija, kao i lipopolisaharide (LPS) na Gram-negativne bakterije (Slika 25-40) i teihoične kiseline na Gram-pozitivne bakterije (videti sliku 25-4D). Oni takođe uključuju molekule u ćelijskim zidovima gljiva kao što su zimosan, glukan i hitin. Mnogi paraziti takođe sadrže jedinstvene komponente membrane koje deluju kao imunostimulansi, uključujući glikozilfosfatidilinozitol u Plasmodium.

Slika 25-40

Struktura lipopolisaharida (LPS). На levo je 3-dimenzionalna struktura molekula LPS-a sa masnim kiselinama prikazanim u žuta i šećeri u Плави. Molekularna struktura baze LPS je prikazana na јел тако. Hidrofobna membrana (više.)

Kratke sekvence u bakterijskoj DNK takođe mogu delovati kao imunostimulansi. Krivac je 𠇌pG motiv”, koji se sastoji od nemetilovanog dinukleotida CpG okruženog sa dva 5′ purinska ostatka i dva 3′ pirimidina. Ova kratka sekvenca je najmanje dvadeset puta ređa u DNK kičmenjaka nego u DNK bakterija, i može aktivirati makrofage, stimulisati inflamatorni odgovor i povećati proizvodnju antitela od strane B ćelija.

Različite klase imunostimulansa povezanih sa patogenom često se javljaju na površini patogena u ponavljajućim obrascima. Prepoznaju ih nekoliko tipova namenskih receptora u domaćinu, koji se zajednički nazivaju receptori za prepoznavanje obrazaca. Ovi receptori uključuju rastvorljive receptore u krvi (komponente sistema komplementa) i receptore vezane za membranu na površini ćelija domaćina (članovi porodice receptora sličnih Tollu). Receptori na ćelijskoj površini imaju dve funkcije: iniciraju fagocitozu patogena i stimulišu program ekspresije gena u ćeliji domaćinu za stimulisanje urođenih imunih odgovora. Rastvorljivi receptori takođe pomažu u fagocitozi i, u nekim slučajevima, direktnom ubijanju patogena.


Biološki aktivni biopolimeri vrganja izazivaju zaustavljanje ćelijskog ciklusa u ćelijama adenokarcinoma debelog creva kod ljudi

Upotreba biološki aktivnih jedinjenja izolovanih iz jestivih pečuraka protiv raka izaziva globalno interesovanje. Antikancerogena svojstva se uglavnom pripisuju biopolimerima, uključujući uglavnom polisaharide, polisaharopeptide, polisaharidne proteine, glikoproteine ​​i proteine. Uprkos činjenici da je vrganj jedna od široko rasprostranjenih i najkonzumiranijih jestivih gljiva, antitumorski biopolimeri izolovani iz njega do sada nisu tačno definisani i proučavani. Ova studija je pokušaj da se ovo znanje proširi na molekularne mehanizme njihovog antikancerogenog delovanja. Biopolimeri pečuraka (polisaharidi i glikoproteini) su ekstrahovani toplom vodom i prečišćeni hromatografijom sa izmenom anjona. Antiproliferativna aktivnost u ćelijama humanog adenokarcinoma debelog creva (LS180) ispitana je pomoću MTT i BrdU testova. Istovremeno je ispitivana citotoksičnost frakcija na epitelnim ćelijama humanog debelog creva (CCD 841 CoTr) pomoću LDH testa. Protočna citometrija i Western blotting su primenjeni na analizu ćelijskog ciklusa i ekspresiju proteina uključenih u antikancerogenu aktivnost odabrane frakcije biopolimera. In vitro studije su pokazale da frakcije izolovane iz Boletus edulis nisu bile toksične protiv normalnih epitelnih ćelija debelog creva i da su u istom opsegu koncentracija izazvale veoma izražen antiproliferativni efekat u ćelijama raka debelog creva. Najbolji rezultati su dobijeni u slučaju frakcije označene kao BE3. Testirano jedinjenje inhibira proliferaciju ćelija raka koja je bila praćena zaustavljanjem ćelijskog ciklusa u G0/G1-fazi. Inhibicija rasta bila je povezana sa modulacijom puta p16/ciklin D1/CDK4-6/pRb, čija je aberacija kritičan korak u razvoju mnogih karcinoma kod ljudi, uključujući rak debelog creva. Naši rezultati pokazuju da biopolimer BE3 iz Boletus edulis poseduje antikancerogeni potencijal i može da pruži novu terapijsku/preventivnu opciju u hemoprevenciji raka debelog creva.


Референце

Proia, N.K., Paszkiewicz, G.M., Nasca, MA, Franke, G.E. & Pauly, J.L. Mutacije ljudskih bukalnih ćelija povezane sa pušenjem i bezdimnim duvanom i njihova povezanost sa oralnim rakom - pregled. Epidemiologija raka, biomarkeri i prevencija: publikacija Američke asocijacije za istraživanje raka, koju sponzoriše Američko društvo za preventivnu onkologiju 15, 1061–1077, https://doi.org/10.1158/1055-9965.EPI-05-0983 (2006).

Schulz, B.L., Cooper-White, J. & Punyadeera, C.K. Istraživanje proteoma pljuvačke: trenutni status i izgledi za budućnost. Kritički osvrti u biotehnologiji 33, 246–259, https://doi.org/10.3109/07388551.2012.687361 (2013).

Jošizava, J.M. et al. Biomarkeri pljuvačke: ka budućim kliničkim i dijagnostičkim koristima. Pregledi kliničke mikrobiologije 26, 781–791, https://doi.org/10.1128/CMR.00021-13 (2013).

Šafer, C.A. et al. Dijagnostika pljuvačke: korišćenje oralnih tečnosti za određivanje zdravstvenog stanja. Monografije iz usmene nauke 24, 88–98, https://doi.org/10.1159/000358791 (2014).

Macdonald, M. et al. Profilisanje imunoglobulina u pljuvački u mirovanju i mehanički stimulisanoj. Bioanalysis 6, 697–704, https://doi.org/10.4155/bio.14.21 (2014).

Cuevas-Cordoba, B. & Santiago-Garcia, J. Saliva: fluid studija za OMICS. Omics: časopis za integrativnu biologiju 18, 87–97, https://doi.org/10.1089/omi.2013.0064 (2014).

Bolonjezi, C. et al. Klinička primena mikronukleusnog testa u eksfoliranim bukalnim ćelijama: sistematski pregled i metanaliza. Istraživanje mutacija. Recenzije u istraživanju mutacija 766, 20–31, https://doi.org/10.1016/j.mrrev.2015.07.002 (2015).

Caragata, M., Shah, A.K., Schulz, B.L., Hill, M.M. & Punyadeera, C. Obogaćivanje i identifikacija glikoproteina u ljudskoj pljuvački upotrebom lektinskih magnetnih kuglica. Analitička biohemija 497, 76–82, https://doi.org/10.1016/j.ab.2015.11.024 (2016).

Langie, S.A. et al. Profiliranje metilacije DNK celog genoma u pljuvački i krvi kod osoba sa respiratornom alergijom. PloS one 11, e0151109, https://doi.org/10.1371/journal.pone.0151109 (2016).

Huarez-Sediljo, T. et al. Isplativa analiza genotipizacije korišćenjem oralnih ćelija u gerijatrijskoj populaciji. Genetika i molekularna istraživanja: GMR 9, 1886–1895, https://doi.org/10.4238/vol9-3gmr939 (2010).

Burnett, G.W. & Scherp, H.W. Oralna mikrobiologija i zarazne bolesti udžbenik za studente i praktičare stomatologije. 322–323 (Williams and Wilkins Co., 1962).

Tomas, P. et al. Test bukalnog mikronukleusa citoma. Protokoli prirode 4, 825–837, https://doi.org/10.1038/nprot.2009.53 (2009).

Aps, J.K., V den Maagdenberg, K., Delanghe, J.R. & Martens, L.C. Protočna citometrija kao nova metoda za kvantifikaciju ćelijskog sadržaja ljudske pljuvačke i njen odnos sa gingivitisom. Clinica chimica acta međunarodni časopis za kliničku hemiju 321, 35–41 (2002).

Thiede, C., Prange-Krex, G., Freiberg-Richter, J., Bornhauser, M. & Ehninger, G. Bukalni brisevi, ali ne i uzorci vode za ispiranje usta, mogu se koristiti za dobijanje otisaka DNK pre transplantacije od primalaca alogene transplantacije koštane srži. Трансплантација коштане сржи 25, 575–577, https://doi.org/10.1038/sj.bmt.1702170 (2000).

Chen, K., Chmait, R.H., Vanderbilt, D., Wu, S. & Randolph, L. Chimerism in monochorionic dizigotic twins: study and review. Američki časopis medicinske genetike. Deo A 161A, 1817–1824, https://doi.org/10.1002/ajmg.a.35957 (2013).

Fumoto, S. et al. Himerizam ćelija bukalne membrane kod monohorionskog dizigotnog blizanca. Pedijatrija 133, e1097–1100, https://doi.org/10.1542/peds.2013-1938 (2014).

Liang, L. & Cookson, W.O. Hvatanje koprive: ćelijska heterogenost i drugi zbunjujući faktori u studijama asocijacija širom epigenoma. Ljudska molekularna genetika 23, R83–88, https://doi.org/10.1093/hmg/ddu284 (2014).

Mill, J. & Heijmans, B.T. Od obećanja do praktičnih strategija u epigenetskoj epidemiologiji. Recenzije o prirodi. Genetika 14, 585–594, https://doi.org/10.1038/nrg3405 (2013).

Michels, K.B. et al. Preporuke za dizajn i analizu studija asocijacija na epigenomu. Prirodne metode 10, 949–955, https://doi.org/10.1038/nmeth.2632 (2013).

Bojl, J.O. et al. Efekti dima cigareta na transkriptom ljudske oralne sluzokože. Cancer Prev Res (Phila) 3, 266–278, https://doi.org/10.1158/1940-6207.CAPR-09-0192 (2010).

Kupfer, D.M., White, V.L., Jenkins, M.C. & Burian, D. Ispitivanje promena diferencijalne ekspresije gena izazvanih pušenjem u bukalnoj sluzokoži. BMC Med Genomics 3, 24, https://doi.org/10.1186/1755-8794-3-24 (2010).

Houseman, E.A. et al. Dekonvolucija podataka o metilaciji DNK bez referenci i posredovanje efektima ćelijske kompozicije. BMC bioinformatika 17, 259, https://doi.org/10.1186/s12859-016-1140-4 (2016).

Langie, S.A. et al. Profilisanje metilacije DNK pljuvačke: aspekti koje treba uzeti u obzir za identifikaciju biomarkera. Osnovna i klinička farmakologija i toksikologija, https://doi.org/10.1111/bcpt.12721 (2016).

Saffery, R. et al. Profil kohorte: Peri/postnatalna studija epigenetskih blizanaca. Int J Epidemiol 41, 55–61, https://doi.org/10.1093/ije/dyr140 (2012).

Smit, A.K. et al. DNK ekstrahovan iz pljuvačke za studije metilacije psihijatrijskih osobina: dokaz specifičnosti tkiva i povezanosti sa mozgom. Američki časopis medicinske genetike. Deo B, Neuropsihijatrijska genetika: zvanična publikacija Međunarodnog društva za psihijatrijsku genetiku 168B, 36–44, https://doi.org/10.1002/ajmg.b.32278 (2015).

Reinius, L.E. et al. Diferencijalna metilacija DNK u prečišćenim ljudskim krvnim ćelijama: implikacije na ćelijsku lozu i studije o podložnosti bolesti. PloS one 7, e41361, https://doi.org/10.1371/journal.pone.0041361 (2012).

Jaffe, A.E. & Irizarry, R.A. Obračun ćelijske heterogenosti je kritičan u studijama asocijacija na epigenomu. Biologija genoma 15, R31, https://doi.org/10.1186/gb-2014-15-2-r31 (2014).

Squier, C. A. & Kremer, M. J. Biologija oralne sluzokože i jednjaka. Časopis Nacionalnog instituta za rak. Monografije, 7–15 (2001).

Marsh, P. D. i Martin, M. V. In Oral Microbiology Ch. 6, 103–145 (Churchill Livingstone Elsevier, 1999).

van Loon, L.A., Krieg, S.R., Davidson, C.L. & Bos, J.D. Kvantifikacija i distribucija podskupina limfocita i Langerhansovih ćelija u normalnoj humanoj oralnoj sluzokoži i koži. Časopis za oralnu patologiju i medicinu: zvanična publikacija Međunarodnog udruženja oralnih patologa i Američke akademije za oralnu patologiju 18, 197–201 (1989).

Houseman, E.A. et al. Nizovi metilacije DNK kao surogat mere distribucije ćelijske smeše. BMC bioinformatika 13, 86, https://doi.org/10.1186/1471-2105-13-86 (2012).

Accomando, W. P., Wiencke, J. K., Houseman, E. A., Nelson, H. H. & Kelsey, K. T. Kvantitativna rekonstrukcija podgrupa leukocita korišćenjem DNK metilacije. Biologija genoma 15, R50, https://doi.org/10.1186/gb-2014-15-3-r50 (2014).

Bibo, M. Sveobuhvatna citopatologija. 1 edn, 884–891 (WB Saunders Company, 1991).


Biologija konačno objašnjava zašto medenog jazavca nije briga

Zvanično je: medenog jazavca nije briga. Ovog „ludog gadnog“ stvorenja – tema dokumentarnog filma National Geographica pretočenog u viralni mem kroz satirično presnimavanje – „zaista me briga“. Ne o zajedljivim dokumentarcima, ne o ubodnim pčelama, i posebno ne o zmijama otrovnicama.

Zmije otrovnice ubiju do 94.000 ljudi svake godine, pored miliona drugih životinja koje čine njihovu ishranu. A smrt od ugriza otrovne zmije nije lepa: toksini u otrovu mogu paralizovati mišiće, razbiti tkivo, pa čak i učiniti da žrtve nekontrolisano krvare.

Pa zašto jazavci ne mare za otrove koji mogu da ubiju skoro svaku drugu životinju?

Danielle Drabeck, studentkinja Univerziteta u Minesoti, htela je da prouči ovo pitanje na molekularnom nivou, ali je naišla na problem: medonosni jazavci se ne nalaze u Minesoti ili čak na zapadnoj hemisferi, već samo u Africi, na Bliskom istoku, i Indija.

„Najteži deo, iskreno Bogu, bilo je pronaći tkivo medonosnog jazavca“ za proučavanje, kaže Drabek — što verovatno objašnjava zašto nijedan drugi biolozi nikada nisu istraživali kako se jazavac odupire otrovu kobre. Radeći sa biologom Šeron Janšom i biohemičarem Antonijem Dinom, Drabek je nabavio dragocenu krv jazavca iz zooloških vrtova San Dijega i Fort Vejna u Indijani.

Sa ovom krvlju, naučnici su prvi put otkrili kako se jazavac na molekularnom nivou brani od svog otrovnog plena. Krv je takođe otkrila tragove evolucione trke u naoružanju. I to bi nam moglo pomoći da dizajniramo bolje protivotrove za ljude koje ugrizu zmije otrovnice.

Ali zašto bi jazavcu bila potrebna otpornost na otrov? Zašto ne izbegava zmije otrovnice, poput razumnijih sisara?

"Zmije", kaže Drabeck, "su odličan izvor mesa." Do 25 procenata svejedine ishrane medonosnog jazavca sastoji se od zmija otrovnica. Ali jazavac ne jede zmije iz očaja. Razvijati se da biste izdržali zmijski otrov je kao da ste jedina osoba na zabavi koja može da jede ekstra ljutu salsu: sve dobijate za sebe. Plus, Drabeck kaže, to znači da jazavac može da lovi plen koji se sporo kreće samo sa jednim šiljastim krajem, umesto brzog plena sa jednim šiljastim krajem plus četiri seta kandži.

Ali to je jedan pakleno oštar kraj. Otrov ima više od 100 proteina i drugih molekula koji potencijalno mogu otrovati žrtvu zmije - što znači da je jazavcima potrebna višestruka odbrana. Da bi suzio polje, Drabeck je pretpostavio da je medonosni jazavac verovatno razvio odbranu sličnu onoj koju koriste druga stvorenja otporna na otrov poput mungosa. Ona se fokusirala na odbranu od gadne klase molekula u otrovu kobre zvanih alfa-neurotoksini koji parališu mišiće koji se koriste za disanje. Ovi neurotoksini se u suštini zadržavaju u nikotinskom acetilholinskom receptoru mišićne ćelije, sprečavajući ćeliju da primi signale nervnog sistema da nastavi da radi.

Drabeck je zaključio da se receptor na meti neurotoksina kobre verovatno promenio kako bi sprečio neurotoksin da se tamo parkira. Kada je dobila krv jazavca meda iz zooloških vrtova, Drabeck je izdvojila DNK i sekvencirala deo gena koji sadrži nacrt za pravljenje receptora. Drabeck je otkrio nekoliko mutacija u tom genu koje podešavaju receptor. Kobrin neurotoksin se dobro uklapa u podešeni receptor kao SUV na parking mestu kompaktnog automobila - i stoga ne može da parališe disanje medonosnog jazavca.

Drabeck nije bila iznenađena ovim mutacijama, ali je bila iznenađena kada je uporedila izmene jazavca sa onima koje se nalaze kod drugih sisara. Ove promene su evoluirale nezavisno u najmanje četiri vrste: medonosni jazavac, mungosi, ježevi i svinje. Jež - koji voli da jede zmije otrovnice - nije bio iznenađenje. Ali svinja? „Bili smo prilično uzbuđeni zbog toga“, kaže Drabek. Nije očekivala da će svinje imati molekularnu odbranu od otrova. Biolozi su znali da divlje svinje mogu da prežive ujede zmija, ali je pretpostavila da je to zato što njihova debela koža i masnoća deluju kao oklop protiv očnjaka. Ali divlje svinje, poput jazavca, dugo dele iste delove sveta kao zmije otrovnice - što im daje podsticaj da razviju otpornost na otrov. A to je zauzvrat dalo zmijama podsticaj da evoluiraju otrovniji otrov.

Otrovne zmije i otporni jazavci medonosni, ispostavilo se, zaključani su u onome što Janša opisuje kao „trku u naoružanju”. Ova ko-evolucija je beskrajni ciklus nadmoćnosti između predatora i plena. Kada zmije otrovnice napadnu medonosni jazavci otporni na otrov, zmije moraju da evoluiraju otrovniji otrov da bi se zaštitile.

Ali šta ovo istraživanje znači za 1,8 miliona nesrećnih ljudi koje svake godine ugrizu zmije otrovnice? Drabeck sugeriše da bi otkrivanje ovih molekularnih podešavanja u receptoru otpornom na medonosnog jazavca moglo predložiti nove načine za stvaranje boljih antivenoma. „To je jedno od važnih pitanja“ o ovom istraživanju medonosnih jazavaca, kaže biolog Džejms Biardi, stručnjak za otpornost na otrov sa Univerziteta Ferfild u Konektikatu. „Šta ovo znači za ljude?“

Trenutno, mnoge infuzije protiv otrova su napravljene od antitela — molekula koje proizvodi imuni sistem konja i ovaca izloženih otrovu, koji mogu da neutrališu otrov kod ugrizenih ljudi. Ali kad god se neko leči ovim antiotrovima, rizikuje da će imati alergijsku reakciju opasnu kao i sam otrov. Razumevanjem više o ciljevima otrova - ciljevima poput receptora neurotoksina medonosnog jazavca - naučnici se mogu nadati da osmisle sigurnije tretmane. Jer za razliku od mungosa, ježa, svinje i medonosnog jazavca, mi ljudi sa svojim slabašnim neurotoksinskim receptorima brinemo - posebno o zmijama otrovnicama.


Virusi medonosnih pčela, saradnici smrtonosne varoe

Ako vaše pčele imaju varou, vaše pčele imaju viruse.

Autori: Philip A. Moore, Michael E. Wilson i John A. Skinner
Odeljenje za entomologiju i patologiju biljaka, Univerzitet Tenesi, Knoxville TN
Prvobitno objavljeno: 21. avgusta 2014

Uvod

Varoa grinje (Varroa spp.) su sveprisutni parazit medonosnih pčela (Apis spp.) kolonije. Uobičajene su skoro svuda gde se nalaze medonosne pčele, i svaki pčelar treba da pretpostavi da ima zarazu varoom, ako se nalaze u geografskom području koje ima varou (varoa grinje nisu uspostavljene u Australiji od proleća 2014). Varoa grinje su prvi put uvedene u zapadnu medonosnu pčelu (Apis mellifera) pre oko 70 godina posle donošenja A. mellifera do rodnog područja istočne pčele (Apis cerana). Varoa grinje (Varroa jacobsoni) u istočnim pčelinjim društvima nanose malu štetu. Ali nakon promene domaćina i širenja širom sveta prirodnim i komercijalnim transportom pčelinjih društava, Varoa je postala glavna zapadna štetočina medonosnih pčela od 1980-ih. Varoa grinje (Varoa destructor) su sada najozbiljnija štetočina zapadnih pčelinjih društava i jedan od primarnih uzroka opadanja medonosnih pčela (Dietemann et al. 2012). Zapadna pčelinja zajednica sa varoom, koja nije tretirana da ubije štetočine, verovatno će uginuti u roku od jedne do tri godine (Korpela et al. 1993 Fries et al. 2006).

Istorija života Varoe

Varoa grinje napadaju pčelinje zajednice kao spoljašnji parazit odraslih pčela i pčela u razvoju, tako što se hrane hemolimfom (tečnost cirkulatornog sistema slična krvi), šireći bolesti i skraćujući njihov životni vek. Dokazi sugerišu da Varoa i njihovi vektorski virusi utiču na imuni odgovor pčela medonosnih, čineći ih podložnijim uzročnicima bolesti (Yang i Cox-Foster 2005). Za više informacija o ovoj temi pogledajte ovde. Zrele ženke varoe opstaju na nezrelim i odraslim pčelama (radilicama, trutovima i retko maticama), crvenkasto braon su i veličine su oko glave igle. Mužjaci grinja su manje veličine i žute boje, ne hrane se pčelama i nalaze se samo u ćelijama legla (Rosenkranz et al. 2010).

Varoa ima dva životna stadijuma, foretičku i reproduktivnu. Foretska faza je kada se zrela varoa grinja zakači za odraslu pčelu i preživi na pčelinjoj hemolimfi. Tokom ove faze grinja može da promeni domaćina često prenoseći viruse tako što pokupi virus na jednoj jedinki i ubrizga ga drugom tokom hranjenja. Foretske grinje mogu pasti sa domaćina, ponekad biti ugrizene kada se pčele neguju jedna drugu, ili mogu umrijeti od starosti. Grinje koje se nalaze na donjoj dasci košnice ili koje padaju preko donje ploče mreže nazivaju se „prirodna kap grinja“. Ali ove grinje koje otpadaju sa pčela predstavljaju mali deo ukupne populacije grinja jer su reproduktivne grinje skrivene ispod poklopca ćelija.

Slika 1: Reproduktivna varoa grinja na kukuljici u razvoju (crvenkasti oval) i dve nezrele varoe (prozirni ovalni). Zasluge: Abdulah Ibrahim (strelice dodane radi naglašavanja)

Reproduktivni životni stadijum Varoe počinje kada je odrasla ženka grinja spremna da položi jaja i prelazi iz odrasle pčele u ćeliju pčele larve u razvoju. Nakon što je ćelija legla zatvorena i larva počne da pupira, grinja počinje da se hrani. Nakon otprilike tri dana od zatvaranja, grinja polaže jaja, jedno neoplođeno jaje (muško) i četiri do šest oplođenih (žensko) jaja (Rosenkranz et al. 2010). Nakon što se jaja izlegu, ženke grinja se hrane kukuljicom, pare se sa mužjakom, a preživele polno zrele ženke grinja ostaju vezane za pčelu domaćina kada ona izađe kao odrasla osoba. Potrebno je šest do sedam dana da ženka grinja sazre od jajeta do odrasle osobe i može da živi dva do tri meseca leti i pet do osam meseci u jesen. Samo zrele ženke grinja mogu preživeti van ćelije legla (faza feroze), a u proseku će grinja proizvesti 1,2 održivo zrelo žensko potomstvo po invaziji radničke ćelije (Schulz 1984 Fuchs & Langenbach 1989). Međutim, pošto je vreme razvoja kod trutovskog legla duže, prosečno održivo potomstvo grinja u ćeliji trutova se povećava na 2,2 po napadnutoj ćeliji (Schulz 1984 Fuchs & Langenbach 1989). Za više informacija o istoriji života Varoe pogledajte ovde.

Virusi

Jedan od ozbiljnih problema koje izaziva varoa je prenošenje virusa na pčele koje izazivaju smrtonosne bolesti. Virusi pronađeni u pčelama poznati su naučnicima već 50 godina i generalno su smatrani bezopasnim sve do 1980-ih kada je varoa postala široko rasprostranjen problem. Od tada je otkriveno skoro dvadeset virusa medonosne pčele i većina njih je povezana sa varoa grinjama, koje deluju kao fizički i/ili biološki vektor (Kevan et al. 2006). Zbog toga će kontrola populacija varoe u košnici često kontrolisati povezane viruse, a pronalaženje simptoma virusnih bolesti ukazuje na epidemiju varoe u koloniji. Virusi su, međutim, najmanje shvaćeni od bolesti pčela. Nove informacije o virusima pčela i dalje menjaju naše razumevanje uloge koju virusi imaju u pčelinjim kolonijama (Genersch i Aubert 2010).

Virusna istorija života

Virusi su mikroskopski organizmi koji se sastoje od genetskog materijala (RNK ili DNK) sadržanog u proteinskom omotaču. Virusi ne dobijaju sopstvene hranljive materije niti žive samostalno, i mogu se razmnožavati samo u živim ćelijama domaćina. Pojedinačna virusna jedinica naziva se virusna čestica ili virion, a obilje ovih čestica u domaćinu naziva se titar virusa. Virusna čestica se ubrizgava u ćeliju domaćina i koristi organele ćelije da napravi kopije sebe. Ovaj proces će se nastaviti bez očiglednih promena u ćeliji, sve dok se ćelija domaćina ne ošteti ili ne umre, oslobađajući velike količine infektivnih virusnih čestica. Svi oblici života su napadnuti virusima i većina je specifična za domaćina.

Virusi medonosnih pčela

Virusi medonosne pčele obično inficiraju stadijum larve ili lutke, ali simptomi su često najočigledniji kod odraslih pčela. Mnogi od ovih virusa se konzumiraju u polenu ili želeu koji proizvode pčele dojilje koji se hrane pčelama u razvoju. Mnoge viruse prenosi i Varoa. Varoa, kada se hrani hemolimfom, prenosi viruse direktno u otvoreni cirkulatorni sistem, koji stiže do svake ćelije u telu insekta.

Virusi medonosnih pčela nisu ograničeni samo na pčele. Virusi medonosne pčele su pronađeni u drugim ne-Apis pčelinje vrste, drugi stanovnici kolonije poput male bube košnice, i u polenu i nektaru (Andersen 1991 Bailey i Gibbs 1964 Genersch et al. 2006 Singh et al 2010). Za više o patogenima medonosnih pčela pronađenim kod domaćih pčela pogledajte ovde. Prenos virusa medonosnih pčela iz zaraženih kolonija u neinficirane jedinke ili kolonije može se desiti tokom hranjenja na običnim cvećem ili kroz pljačku slabih ili urušenih kolonija (Singh et al 2010).

Identifikacija virusa je teška zbog male veličine čestica. Za tačnu dijagnozu potrebna je skupa i često neobična laboratorijska oprema. Međutim, simptomi nekih virusnih bolesti su vidljiviji, posebno kod očigledne infekcije. Nedostatak simptoma ne isključuje prisustvo virusa. Virusi mogu ostati u latentnom obliku unutar domaćina, delujući kao rezervoar infekcije, komplikujući dijagnozu i kontrolu, i postaju izbijanje samo kada su uslovi odgovarajući.

Prevalenca virusa u Sjedinjenim Državama

USDA-APHIS Nacionalna anketa o štetočinama i bolestima medonosnih pčela uzela je uzorke iz pčelinjih društava u preko 27 država od 2009. godine. Podaci iz ovih istraživanja i drugi podaci se unose u bazu podataka sa Bee Informed Partnership i koristi se za određivanje osnovnog nivoa bolesti, određivanje odsustva egzotičnih štetočina medonosnih pčela koje još nisu pronađene u Americi i za procenu ukupnog zdravlja pčelinjih kolonija u SAD. Rezultati prisustva virusa iz istraživanja iz 2013. su u nastavku (Slika 1). Virus deformisanog krila (DWV) i virus crne matice (BQCV) bili su prisutni u preko 80% uzorkovanih kolonija. Drugi virusi su bili mnogo ređi, ali su i dalje prisutni u 10-20 procenata uzorkovanih kolonija. Od virusa testiranih na prisustvo, samo virus spore pčelinje paralize (SBPV) nije pronađen u SAD

Slika 1: 2013 USDA-APHIS Nacionalna anketa o štetočinama i bolestima medonosnih pčela, rezultati prevalencije virusa (Virusne skraćenice: BQCV=virus crne matice DWV= virus deformisanog krila LSV2= virus jezera Sinai 2 ABPV= virus akutne pčelinje paralize Kashmir virus IAPV= Izraelski virus akutne paralize CBPV= virus hronične pčelinje paralize SBPV= virus spore paralize pčela)

Sacbrood

Sacbrood, bolest koju izaziva virus, bio je prvi virus medonosne pčele koji je otkriven početkom 20. veka i sada ima široko rasprostranjenu rasprostranjenost. To je možda najčešći virus medonosne pčele (Shen et al. 2005). Ova bolest je pronađena kod odraslih pčela, matica, jaja i larvi, u svim oblicima hrane i kod varoa grinja, što ukazuje na širok spektar puteva prenosa. Iako se obično nalazi bez ozbiljnih izbijanja, mamice imaju veću verovatnoću da izazovu bolest kada je podela rada manje definisana, u ranim delovima godine pre protoka nektara, ili tokom dugotrajne nestašice (Bailey 1981). Često prođe nezapaženo jer obično zarazi samo mali deo legla, a odrasle pčele obično otkrivaju i uklanjaju zaražene larve.

Slika 2: kukuljica zaražena Sacbrood-om. Zasluge: Michael E. Wilson

Bolest dovodi do toga da larve ne uspeju da odbace svoju poslednju kožu pre pupiranja, nakon što je larva ispredala svoju čahuru. Zaražene larve ostaju na leđima sa glavom prema poklopcu ćelije. Tečnost se akumulira u telu i boja će se promeniti od biserno bele do bledo žute, pri čemu će glava prvo promeniti boju. Zatim, nakon što larva ugine, postaje tamno smeđa sa crnom glavom (Slika 2). Larve koje su progutale dovoljne količine sačme u svojoj hrani umiru nakon što su zapečaćene u svom saću.

Sacbrood se umnožava u nekoliko telesnih tkiva mladih larvi, ali ove larve izgledaju normalno do zatvaranja ćelija. Svaka larva koja ugine od sacbrod sadrži dovoljno čestica virusa da inficira svaku larvu u 1000 kolonija (Bailey 1981). Ali u većini slučajeva, bolesne larve brzo uklanjaju pčele dojilje u ranim stadijumima bolesti. Poklopci ćelija se prvo probijaju da bi se otkrila bolest, što je dobar znak infekcije za pčelara (Slika 6). Zatim mlade pčele radilice uklanjaju obolele larve iz društva. Odrasle pčele, iako nisu podložne infekciji, postaju luka pošto se virus skuplja u hipofaringealnim žlezdama pčela, koje se koriste za proizvodnju želea od larvi (Bailey 1981). Ove zaražene odrasle pčele, međutim, prestaju da jedu polen i ubrzo prestaju da brinu o larvama. Oni će postati sakupljači hrane brže nego obično i teže da sakupljaju nektar umesto polena (Bailey 1981). Nektar koji sadrži virus se razblaži u koloniji kada se pomeša sa nektarom drugih sakupljača hrane. Dok se polen sakuplja i sabija u „korpicu za polen” i netaknut odlaže u ćeliju. Razređeni virus koji sadrži nektar je manje verovatno da će izazvati infekciju nego kada je virus koncentrisan u polenu. Zato budite oprezni kada prenosite okvire sa polenom između kolonija. Malo se zna o drugim putevima prenosa: preko Varoa grinja, između radnika, sa pčelinjeg izmeta ili preko transovarijalnog prenosa (sa matice na jaje). Plod meda obično nestaje u kasno proleće kada počinje protok meda, ali ako simptomi potraju, preporučuje se obnavljanje matičnjaka sa higijenskim fondom (Frazier et al. 2011).

Virus deformisanog krila (DWV)

Virus deformisanih krila je čest, široko rasprostranjen i blisko povezan sa varoa grinjama. I titar virusa i prevalencija virusa u kolonijama direktno su povezani sa infestacijom varoom (Bowens-Walker et al. 1999). U kolonijama koje su u velikoj meri inficirane Varoom, skoro 100 procenata odraslih radnika može biti zaraženo DWV-om i imati visoke titre virusa čak i bez pokazivanja simptoma (de Miranda et al. 2012). DWV je snažno povezan sa zimskom smrtnošću kolonija (Highfield et al 2009 Genersch et al 2010). Kontrola DWV-a se obično postiže tretmanom protiv varoe. Nakon tretmana dolazi do postepenog smanjenja titra virusa kako se zaražene pčele zamenjuju zdravim (Martin et al 2010). DWV se može naći u svim kastama i životnim fazama pčela medonosnih pčela i perzistiraće kod odraslih bez očiglednih simptoma. DWV se takođe prenosi hranom, izmetom, sa matice na jaje i sa truta na maticu (de Miranda et al. 2012).

Slika 3: Odrasle pčele sa deformisanim krilima kao rezultat DWV. Zasluge: Ketrin Aronštajn

Akutne infekcije DWV-a su obično povezane sa visokim nivoom infestacije varoom (Martin et al 2010). Prikrivene infekcije (detektativni nivo virusa bez štetnih simptoma) mogu se javiti preko transovarijalnog prenosa (Chen et al. 2004) i putem hrane larvi (Chen et al. 2006). Simptomi koji se primećuju kod akutnih infekcija uključuju ranu smrt kukuljica, deformisana krila, skraćeni abdomen i promenu boje zanoktice kod odraslih pčela, koje umiru u roku od 3 dana, što dovodi do konačnog kolapsa kolonije. Ne razvijaju sve lutke inficirane grinjama ove simptome, ali sve odrasle pčele medonosne sa simptomima razvijaju se iz parazitiranih kukuljica. Pčele zaražene kao odrasle mogu imati visoke titre virusa, ali ne razvijaju simptome. DWV takođe može uticati na agresiju (Fujiyuki et al. 2004) i učenje ponašanja odraslih pčela (Iqbal i Muller 2007). Čini se da se DWV replicira u Varoi, što ga čini biološkim i fizičkim vektorom. Infekcija kukuljica može zavisiti od replikacije DWV kod Varoe pre prenosa. Smrtnost zimskih kolonija je snažno povezana sa prisustvom DWV-a, bez obzira na infestaciju varoom. Ovo sugeriše da infekciju varoom treba smanjiti u koloniji mnogo pre nego što se zimuju pčele, kako bi se obezbedilo smanjenje titra DWV. DWV je blisko povezan sa Kakugo Virus и Varoa destructor Virus 1, koji zajedno čine kompleks virusa deformisanog krila (de Miranda et al. 2012).

Virus ćelije crne kraljice (BQCV)

Virus crne matice je široko rasprostranjen i uobičajen virus koji perzistira kao asimptomatske infekcije pčela radilica i legla. Iako se generalno smatra asimptomatskim kod odraslih pčela, Shutler et al. (2014) otkrili su da je BQCV povezan sa simptomom K-krila, gde je par krila razdvojen i više upravan jedno na drugo. Kukulice kraljice sa simptomima pokazuju bledožutu kožu nalik na vreću sacbrood. Kukuljice brzo potamne nakon smrti i postanu tamnosmeđe do crne zidove matične ćelije. Takođe su primećene simptomatske lutke trutova. Za razliku od drugih virusa koji su povezani sa Varoom, BQCV je snažno povezan sa Nosema apis i malo dokaza podržava njegovu pojavu zajedno sa Varoom, iako je BQCV izolovan od Varoe (Ribière et al. 2008). Nosema bolest utiče na srednja creva pčele, povećavajući osetljivost probavnog trakta na infekciju BQCV. BQCV se može oralno preneti na odrasle samo kada je nozema koinficirana (Ribière et al. 2008). Takođe se može preneti injekcijom na lutke. BQCV ima sezonski odnos sličan Nosemi, sa snažnim vrhuncem u proleće. Zbog sezonske pojave nozeme, operacije uzgoja matica koje proizvode matice u proleće su podložne BQCV (Ribière et al. 2008).

Slika 4: Dizenterija na prednjem delu košnice je simptom, ali ne ukazuje na bolest nozema. Zasluge: Michael E. Wilson

Virus hronične pčelinje paralize (CBPV)

Virus hronične paralize pčela bio je jedan od prvih izolovanih virusa pčela. Jedinstven je među virusima medonosnih pčela po tome što ima različitu veličinu čestica i sastav genoma. To je takođe jedini uobičajen virus pčela koji ima i vizuelno ponašanje i fiziološke modifikacije koje su rezultat infekcije. Simptomi bolesti se primećuju kod odraslih pčela koje pokazuju jedan od dva skupa simptoma koji se nazivaju sindromi (Genersch & Aubert 2010). Simptomi tipa 1 uključuju drhtanje krila i tela odraslih pčela, koje nisu u stanju da lete, i puze po zemlji ili uzduž stabljika biljaka, često skupljajući se zajedno. Pčele takođe mogu imati naduven stomak, što izaziva dizenteriju i uginut će u roku od nekoliko dana nakon pojave simptoma.

Simptomi tipa 2 su masne, bez dlake, crne odrasle pčele koje mogu da lete, ali u roku od nekoliko dana postaju neletne, drhte i ubrzo umiru (Slika 5). Oba ova sindroma mogu se javiti unutar iste kolonije. Jako pogođena društva, često najjače na pčelinjaku (Ribiere i sar. 2010), brzo gube odrasle radnike, uzrokujući kolaps i često ostavljajući nekoliko odraslih pčela sa maticom na saću bez nadzora (Bailey & Ball 1991). Ovi simptomi su, međutim, slični i često se mešaju sa drugim bolestima pčela, uključujući Nosema apis, poremećaj kolapsa kolonije (CCD), trahealne grinje, hemijska toksičnost i drugi virusi.

Slika 5: Pčele sa simptomima CBPV tipa 2: masne i bez dlake. Zasluge: Agencija za istraživanje hrane i životne sredine (Fera), Crown Copyright

Prenos virusa se prvenstveno dešava direktnim telesnim kontaktom, mada se takođe javlja i oralni prenos, ali je mnogo manje virulentan. Direktan prenos tela se dešava kada su pčele ili gužve ili zatvorene u košnici tokom dužeg vremenskog perioda (zbog lošeg vremena ili tokom transporta na velike udaljenosti) ili kada se previše kolonija hrani na ograničenom području, kao što je monokultura suncokreta. sa velikom gustinom pčelinjeg društva (Genersch & Aubert 2010). U oba slučaja, mali rezovi od polomljenih dlaka na kožici odrasle pčele i direktan kontakt sa zaraženim odraslim pčelama šire virus kroz njihove izložene pore ako se to dogodi brzo i ako je dovoljno odraslih pčela zaraženo, doći će do epidemije sa smrtnošću kolonija. Izmet zaraženih pčela unutar kolonije takođe može širiti bolest, a drugi putevi prenosa se još uvek istražuju, uključujući mogući prenos varoe. Virus je široko rasprostranjen i može doći do izbijanja u bilo koje doba godine. Proleće i leto su najčešća godišnja doba za smrtnost od virusa, ali on će opstati u koloniji tokom cele godine bez ispoljavanja bilo kakvih očiglednih simptoma (de Miranda et al. 2012).

Dva nova virusa povezana sa CBPV-om bez još opisanih simptoma su Virus jezera Sinai 1 (LSV1) и Virus jezera Sinai 2 (LSV2) (Runckel et al. 2011). Novi molekularni alati omogućili su istraživačima da identifikuju prisustvo ovih i drugih novih virusa i njihovu sezonskost u test kolonijama. Malo se toga zna o virusima jezera Sinai, uključujući njihov patogeni ili epidemiološki značaj. Drugi opisani virusi pčela medonosnih pčela koji su otkriveni pre pojave molekularnih tehnika nemaju genomske podatke za referencu, stoga novootkriveni virusi mogu u stvari biti već otkriveni virusi iz prošlosti, kao npr. Virus pčela X i Y, Arkanzas Bee Virus ili Berkeley Bee Virus (Runckel et al. 2011).

Kompleks virusa akutne paralize pčela

Virus akutne paralize pčela (ABPV), virus kašmirske pčele (KBV) i virus izraelske akutne paralize (IAPV) su kompleks povezanih virusa sa sličnim putevima prenosa i utiču na slične životne faze. Ovi virusi su široko rasprostranjeni pri niskim titrima i mogu brzo razviti visoke titre zbog izuzetno virulentne patologije. Često povezan sa gubitkom kolonija, ovaj virusni kompleks je posebno smrtonosan kada su kolonije jako zaražene varoa grinjama. (Ball 1989 Genersch 2010, Genersh et al. 2010). Nije pokazano da ovi virusi izazivaju simptome u fazama života larve, ali pokazuju brzu smrtnost kod lutki i odraslih pčela.

Virus akutne pčelinje paralize (ABPV)

Virus akutne paralize pčela slučajno je otkriven kada je CBPV prvi put izolovan. Međutim, ABPV pokazuje slične simptome kao CBPV akutna pridev opisuje bržu smrtnost pčela u poređenju sa CBPV. Za razliku od CBPV, virulencija ABPV je direktno povezana sa infestacijom varoom. APBV se prenosi u mleču od larve sa asimptomatskih zaraženih odraslih pčela na larvu u razvoju ili kada se varoa grinje prenosi na larve i lutke. ABPV je uobičajen i obično izaziva prikrivene infekcije (bez očiglednih simptoma) kada se oralno prenosi sa odrasle na pčelu u razvoju. Potrebno je oko milijardu virusnih čestica da izazovu smrt putem gutanja, ali kada se vektori od Varoe i direktno ubrizgaju u hemolimfu pčela u razvoju, samo 100 virusnih čestica će izazvati smrt (Genersch & Aubert 2010). Kada virus pokupi Varoa, stopa prenosa na lutke je između 50 i 90 procenata. Što je duži period hranjenja Varoe, to će biti veća brzina prenosa. (Genersch & Aubert 2010). Kukulice zaražene ABPV-om umiru pre nego što se pojave, čineći pojavu simptoma paralize manje očiglednim. Smanjenje broja pčela u nastajanju uzrokuje da se kolonija smanjuje ka kolapsu. Kolonija zaražena epidemijom ABPV-a će umrijeti u roku od jedne sezone (Sumpter i Martin 2004).

Kašmirski pčelinji virus (KBV)

Kašmirski pčelinji virus je široko rasprostranjen i smatra se najvirulentnijim virusom medonosne pčele u laboratorijskim uslovima (Allen i Ball 1996). Kada se KBV ubrizga u hemolimfu odrasle pčele, smrt nastupa za samo 3 dana (de Miranda et al. 2012). KBV ne izaziva infekciju kada se hrani pčelama u razvoju, ali perzistira kod odraslih pčela i pčela u razvoju bez ikakvih očiglednih simptoma. Kada varoa grinje prenesu virus, on postaje smrtonosan za sve oblike životnog ciklusa pčela, ali ne pokazuje jasno definisane simptome. Čak i sa umerenim nivoima infestacije grinjama, KBV, kao i ABPV, može da ubije kolonije (Todd et al. 2007). Kontrola varoa grinja je neophodna da bi se sprečio gubitak kolonija od KBV.

Izraelski virus akutne paralize (IAPV)

Simptomi IAPV-a su slični ABPV-u i CBPV-u, uključujući: drhtanje krila, zatamnjene stomake bez dlaka i grudnog koša, koji napreduju u paralizu i smrt. IAPV se nalazi u svim životnim fazama i kastama pčela. Utvrđeno je da su IAPV i drugi virusi snažno povezani sa poremećajem kolapsa kolonija (CCD) u Sjedinjenim Državama, ali još uvek nije dokazana direktna veza između virusa i CCD (Cox-Foster et al. 2007). IAPV je izuzetno virulentan pri visokim titrima, kao kada ga vektori Varoa, a prikriven je pri niskim titrima.

Virus spore pčelinje paralize

Za razliku od ABPV, koji proizvodi simptome nekoliko dana nakon infekcije, SBPV izaziva paralizu nakon 12 dana, i to samo na dve prednje (prednje) noge. SBPV perzistira kao prikrivena infekcija i Varoa ga prenosi na odrasle i lutke. Bolest će ubiti odrasle pčele i na kraju celu koloniju (de Miranda et al. 2012). Prevalencija virusa je ograničena. Nije pronađen u SAD, ali je pronađen u Engleskoj, Švajcarskoj, Fidžiju i Zapadnoj Samoi, a samo u Britaniji je SBPV povezan sa smrtnim slučajevima u kolonijama (Carreck et al. 2010).

Rezime

Većina patogena napada probavni sistem oralnim unosom inokulisane hrane. Ovi patogeni inficiraju epitelne ćelije srednjeg creva, koje se stalno zamenjuju i zaštićene su membranama i filterima koji ograničavaju patogena na tkiva creva. Paraziti koji inficiraju crevno tkivo kao Nosema apis и Nosema cerana može stvoriti lezije u epitelu koje omogućavaju virusu poput BQCV da prođe u hemolimfu i inficira druge ćelije u telu. Za razliku od spoljašnjeg parazita Varoa destructor hrani se direktno pčelinjom hemolimfom pružajući otvor u kožici za ulazak virusa. Većina virusnih infekcija retko izaziva infekciju kada se proguta oralno, ali samo nekoliko virusnih čestica je neophodno da izazovu infekciju kada se ubrizgaju direktno u hemolimfu. Mnogi virusi se mogu direktno preneti Varoa grinjama, kao što su: DWV, oni u kompleksu virusa akutne paralize pčela i virus spore paralize pčela. Drugi virusi, kao što je sacbrood, otkriveni su u varoa grinjama, ali nije dokazano da varoa direktno prenosi virus. Pokazalo se da se neki virusi, kao što je DVV, direktno razmnožavaju u varoa grinjama, ali u većini slučajeva ne znamo tačan odnos Varoa grinja i virusa ili dovoljno o tome kako se prenos odvija sa grinja na pčele. Saznanja o prisustvu, ulozi i putevima prenosa ovih virusa kod domaćih pčela i drugim potencijalnim putevima prenosa koji nisu varoa takođe nedostaju u detaljima, što komplikuje preporuke za kontrolu. Istraživanja pokazuju da virusi jasno utiču na zdravlje pčela i zahtevaju pažnju i pčelara i istraživača.

Kontrola

Virusi opstaju u normalnim, zdravim kolonijama, da bi eksplodirali tokom stresa. Mnogi virusi su štetni samo kada su u kombinaciji sa drugim stresorima kao što su varoa ili nozema. Aktivno, integrisano upravljanje varoom i drugim stresorima je od suštinskog značaja za minimiziranje titra virusa. Da biste saznali više o smanjenju stresora pomoću najboljih praksi upravljanja, pogledajte ovde.

Rutinski pregledajte svoje kolonije na moguće bolesti. Imajte temeljno znanje o simptomima i identifikujte kada se kolonije sporo stvaraju ili imaju sporadične obrasce legla, što ukazuje da je leglo izvučeno i uklonjeno (Slika 6). Ako sumnjate da imate neku bolest, uzmite uzorak i pošaljite ga na identifikaciju. Za više informacija o podnošenju uzorka na dijagnozu pogledajte ovde.

Slika 6: Probušeni poklopci ćelija koji ukazuju na to da su odrasle pčele otkrile bolest legla (obratite pažnju na odraslu pčelu zaraženu DWV). Zasluge: Agencija za istraživanje hrane i životne sredine (Fera), Krunska autorska prava (strelice dodate radi naglašavanja)

Drugi budući načini kontrole uključuju uzgoj higijenskih sojeva pčela koji otkrivaju bolesti legla i uklanjaju zaražene jedinke iz kolonija ili uzgoj otpornosti na zarazu varoom. Specifična otpornost na viruse se još uvek ne razmatra u većini programa za uzgoj. Postoje dokazi o specifičnoj otpornosti na viruse kod pčela medonosnih pčela, a bilo je i pokušaja da se stvori otpornost na IAPV. Za više o ovoj temi pogledajte ovde.

Još jedno obećavajuće područje istraživanja za kontrolu virusa medonosnih pčela u korišćenju utišavanja gena pod nazivom RNAi. Privatna kompanija za istraživanje pčela Beeologics, kao i istraživači sa javnih i privatnih univerziteta razvijaju ovu metodu i potrošački proizvod bi mogao biti dostupan u bliskoj budućnosti jer RNAi tehnologija nastavlja da postaje efikasnija i jeftinija. Za više o ovoj temi pogledajte ovde.

Allen, M. i BV Ball. 1996. Učestalost i svetska rasprostranjenost virusa medonosne pčele. Bee World 77: 141-162.

Anderson DL (1991) Kašmirski pčelinji virus – relativno bezopasan virus pčelinjih društava. Сам. Bee J. 131: 767–770.

Bailey, L. 1981. Patologija medonosnih pčela. Academic Press. London. 9-25.

Bailey, L. i B.V. Ball. 1991. Patologija medonosnih pčela (2. izd.). Academic Press. London

Bailey L, Gibbs AJ (1964) Akutna infekcija pčela virusom paralize. J. Insect Pathol. 6: 395–407.

Ball, BV 1989. Varroa jacobsoni kao vektor virusa. In Sadašnji status varoatoze u Evropi i napredak u kontroli varoa grinja. Proc. Sastanak, Undine, Italija, 1988. Cavalloro, E. (Ed.) EC-Experts Group, Luksemburg. str. 241-244.

Bowen-Walker, P. L., S. J. Martin, & A. Gunn. 1999. Prenos virusa deformisanih krila između pčela (Apis mellifera L.) od strane ektoparazitske grinje Varroa jacobsoni Oud. Časopis za patologiju beskičmenjaka 73(1), 101-106.

Carreck, N. L., D. V. Ball, & S. J. Martin. 2010. Kolaps kolonije medonosnih pčela i promene u prevalenciji virusa povezane sa Varoa destructor. J. Apic. Res. 49(1), 93-94.

Chen, Y. P., J. S. Pettis, A. Collins, & M. F. Feldlaufer. 2006. Prevalencija i prenos virusa medonosnih pčela. Primenjena i ekološka mikrobiologija 72(1), 606-611.

Chen, Y., J. S. Pettis, J. D Evans, M. Kramer, & M. F. Feldlaufer. 2004.Prenos virusa kašmirske pčele preko ektoparazitske grinje Varoa destructor. Apidologie 35(4), 441-448.

Cox-Foster, DL, S. Conlan, EC Holmes, G. Palacios, JD Evans, NA Moran, P. Quan, T. Briese, M. Hornig, DM Geiser, V. Martinson, D. van Engelsdorp, AL Kalkstein, A Drysdale, J. Hui, J. Zhai, L. Cui, SK Hutchinson, JF Simons, M. Egholm, JS Pettis, WI Lipkin. 2007. Metagenomski pregled mikroba u poremećaju kolapsa pčelinjeg društva. Наука 318(5848), 283-287.

Dietemann, V., J. Pflugfelder, D. Anderson, JD Charrière, N. Chejanovsky, B. Dainat, J. de Miranda, K. Delaplane, F. Diller, S. Fuch, P. Gallman, L. Gauthier, A Imdorf, N. Koeniger, J. Kralj, W. Meikle, J. Pettis, P. Rosenkranz, D. Sammataro, D. Smith, O. Yanez, P. Neumann. 2012. Varoa destructor: istraživački putevi ka održivoj kontroli. Journal of Apicultural Research 51(1): 125-132

Evans, J. D. i R. S. Schwarz. 2011. Pčele stavljene na kolena: mikrobi koji utiču na zdravlje pčela. Trendovi u mikrobiologiji 19(12), 614-620.

Francis, R. M., S. L. Nielsen, i str. Kryger. 2013. Interakcija Varoa-virus u kolapsu pčelinjih društava. PloS one 8(3).

Fujiyuki, T., H. Takeuchi, M. Ono, S. Ohka, T. Sasaki, A. Nomoto, & T. Kubo, 2004. Novi virus nalik pikorni insekata identifikovan u mozgu agresivnih pčela radilica. Journal of virology 78(3), 1093-1100.

Fraxier, M., C. Dewey, & D. van Engelsdorp. 2011. Terenski vodič za pčele i njihove bolesti. Ag komunikacije i marketing # AGRS-116. Državni univerzitet Pensilvanije.

Fries, I, A. Imdorf, P. Rosenkranz. 2006. Opstanak infestiranih grinja (Varoa destructor) пчела (Apis mellifera) kolonije u nordijskoj klimi. Apidologie 37: 564-570

Fuchs, S. & K. Langenback. 1989. Multiple infestation of Apis mellifera L. ćelije legla i reprodukcija in Varroa jacobsoni Oud. Apidologie, 20, 257–266.

Genersch, E. 2010 Patologija medonosnih pčela: Trenutne pretnje medonosnim pčelama i pčelarstvu. Appl. Microbiol. Biotechnol. 87, 87-97.

Genersch, E., W. von der Ohe, H. Kaatz, A. Schroeder, C. Otten, R. Büchler … & P. ​​Rosenkranz. 2010. Nemački projekat praćenja pčela: dugoročna studija za razumevanje periodično visokih zimskih gubitaka pčelinjih društava. Apidologie 41(3), 332-352.

Genersch, E., & M. Aubert. 2010. Virusi medonosne pčele (Apis mellifera L.) u nastajanju i ponovnom pojavljivanju. Veterinarska istraživanja 41(6), 54.

Genersch, E., C. Yue, I. Fries, & J. R. de Miranda. 2006. Detekcija virusa deformisanog krila virusnog patogena medonosne pčele, kod bumbara (Bombus terrestris i Bombus pascuorum) sa deformitetima krila.Časopis za patologiju beskičmenjaka 91(1), 61-63.

Gochnauer, T. A. 1978. Virusi. U Morse, R. A., & Nowogrodzki, R. (ur.) Štetočine, predatori i bolesti pčela medonosnih, (2. izd.). Cornell University Press.

Highfield, A. C., A., El Nagar, L. C. Mackinde, M. L. N. Laure, M. J. Hall, S. J. Martin i D. C. Schroeder. 2009. Virus deformisanog krila umešan u gubitke pčelinjih društava tokom zimovanja. Primenjena i ekološka mikrobiologija 75(22), 7212-7220.

Iqbal, J., & U. Mueller. 2007. Virusna infekcija izaziva specifične nedostatke u učenju kod pčelara za hranu. Zbornik radova Kraljevskog društva B: Biološke nauke 274(1617), 1517-1521.

Kevan, P. G., M. A. Hannan, N. Ostiguy, & E. Guzman-Novoa. 2006. Rezime kompleksa bolesti Varoa-virus kod medonosnih pčela. Сам. Bee J. 146 (8), 694-697.

Korpela, S. A. Aarhus, I. Fries, H. Hansen. 1992. Varroa jacobsoni Oud. u hladnim klimatskim uslovima: porast populacije, zimska smrtnost i uticaj na opstanak pčelinjih društava. Journal of Apicultural Research 31: 157-164.

Martin, S. J., B. V. Ball, & N. L. Carreck. 2010. Prevalencija i perzistentnost virusa deformisanih krila (DWV) u netretiranim ili akaricidima tretiranim kolonijama medonosnih pčela (Apis mellifera) infestiranih Varroa destructor. Journal of Apicultural Research 49(1), 72-79.

de Miranda, J. R., B. Dainat, B. Locke, G. Cordoni, H. Berthoud, L. Gauthier, … i D. B. Stoltz. 2010. Genetička karakterizacija virusa spore pčelinje paralize medonosne pčele (Apis mellifera L.). Časopis za opštu virusologiju 91(10), 2524-2530.

de Miranda, J. R., L. Gauthier, M. Ribiere i Y. P. Chen. 2012. Virusi medonosnih pčela i njihov uticaj na zdravlje pčela i društva. U D. Sammataro & J. Yoder (Eds.) Zdravlje pčelinjeg društva: izazovi i održiva rešenja. CRC Press. Boca Raton. 71-102.

Ribière, M., B. Ball, & M. Aubert. 2008. Prirodna istorija i geografska rasprostranjenost virusa medonosnih pčela. U M. Aubertu (ur.) Virologija i medonosna pčela. Evropske zajednice, Luksemburg, 15-84.

Ribière, M., V. Olivier, & P. ​​Blanchard. 2010. Hronična paraliza pčela: bolest i virus kakvih nema? Časopis za patologiju beskičmenjaka 103, 120-131.

Rosenkranz, P., P. Aumeier, & B. Ziegelmann. 2010. Biologija i kontrola Varoa destructor. Časopis za patologiju beskičmenjaka 103, 96-119.

Runckel, C., M. L. Flenniken, J. C. Engel, J. G. Ruby, D. Ganem, R. Andino i J. L. DeRisi. 2011. Vremenska analiza mikrobioma medonosne pčele otkriva četiri nova virusa i sezonsku prevalenciju poznatih virusa, Nosema, и Crithidia. PloS one 6(6).

Schulz, A. 1984. Reprodukcija und Populationsentwicklung der parasitischen Milbe Varroa jacobsoni Oud. in Abhänkgigkeit vom Brutzyklus ihres Wirtes Apis mellifera L. Apidologie 15, 401–420.

Shen, M., L. Cui, N. Ostiguy, & D. Cox-Foster. 2005. Zamršeni putevi prenosa i interakcije između virusa sličnih picorni (virus kašmirske pčele i virus sacbrood) sa domaćinom medonosne pčele i parazitskom grinjom Varoa. Časopis za opštu virusologiju 86(8), 2281-2289.

Shutler, D., Head, K., Burgher-MacLellan, K.L., Colwell, M.J., Levitt, A.L., Ostiguy, N., & Williams, G.R. (2014). Пчела Apis mellifera Paraziti u odsustvu Nosema ceranae Gljive i Varoa destructor Grinje. PloS one,9(6), e98599.

Singh R, Levitt AL, Rajotte EG, Holmes EC, Ostiguy N, et al. (2010) RNK virusi u oprašivačima Hymenopteran: dokazi transmisije virusa među taksa putem polena i potencijalni uticaj na ne-Apis Hymenopteran Species. PLoS ONE 5(12).

Sumpter, D.J., & S.J. Martin 2004. Dinamika epidemija virusa u kolonijama medonosnih pčela zaraženih Varoom. Časopis za ekologiju životinja, 73(1), 51-63.

Todd, J. H. J. R. de Miranda i B. V. Ball. 2007. Incidencija i molekularna karakterizacija virusa pronađenih u umirućim novozelandskim pčelama (Apis mellifera) kolonije zaražene Varoa destructor. Apidologie 38: 354-367.


Regulisana nekroza kod plućne bolesti. Fokus na nekroptozu i feroptozu

Do danas, sve veći broj dokaza ukazuje na moguću umešanost različitih vrsta ćelijske smrti u bolesti pluća. Priznata regulisana ćelijska smrt uključuje nekrotičnu ćelijsku smrt koja je imunogena, oslobađajući molekularne obrasce povezane sa oštećenjem i izazivajući upalu tkiva. Nekroptoza je dobro shvaćeni oblik regulisane nekroze koju izvršavaju RIPK3 (protein kinaza 3 u interakciji sa receptorom) i pseudokinaza MLKL (protein sličan domenu kinaze mešovite loze). Feroptoza je novoopisani oblik regulisane nekroze nezavisan od kaspaze koji se karakteriše povećanjem štetnih lipidnih reaktivnih vrsta kiseonika proizvedenih peroksidacijom lipida zavisnom od gvožđa. Uloga ova dva puta ćelijske smrti razlikuje se u zavisnosti od bolesti, tipa ćelije i mikrookruženja. Štaviše, neki eksperimentalni modeli ćelijske smrti su pokazali zajedničku feroptotičku i nekroptotičku ćelijsku smrt i sinergistički efekat istovremene inhibicije. Ovaj pregled ispituje ulogu regulisane nekrotične ćelijske smrti, posebno nekroptoze i feroptoze, u patogenezi bolesti pluća u kontekstu nedavnih uvida u uloge ključnih efektorskih molekula ova dva puta ćelijske smrti.

Ćelijska smrt je ključni proces za suočavanje sa povredama ili stresom izazvanim poremećajima ćelijskog mikrookruženja u višećelijskim organizmima. Tokom protekle decenije, mehanizam poznat kao „regulisana ćelijska smrt“ (RCD) je prepoznat kao sastavni deo homeostaze tkiva, posebno kao odgovor na stresna stanja (1, 2). Apoptoza, poznata kao prototipski oblik RCD, dobro je proučavana i smatra se da eliminiše nepotrebne i štetne ćelije, uključujući ćelije inficirane virusom, stare ćelije i ćelije raka (3–5). Međutim, mehanizam kojim apoptoza, imunološki tihi oblik ćelijske smrti, utiče na patogenezu bolesti, uključujući inflamatorne bolesti, nije dobro shvaćen. Suprotno tome, nekroza se dugo smatrala oblikom puke slučajne ćelijske smrti izazvane teškim stimulansima i stoga je zamišljena kao proces koji se ne može kontrolisati. Tokom protekle decenije, niz istraživanja je otkrio regulisanu nekrozu (RN) kao neapoptotični oblik RCD koji se oslanja na genetski kodiranu molekularnu mašineriju (6). Do sada su ustanovljeni različiti oblici RN puteva koji emituju abnormalne signale kao što su molekularni obrasci povezani sa oštećenjem (DAMP) da bi upozorili ćelije životne sredine na opasnost (7) (Tabela 1). Čini se da su nekrotične forme RCD međusobno povezane putem oslobađanja DAMP-a i formiraju nekroinflamatornu autoamplifikacionu petlju, što dovodi do oštećenja tkiva i disfunkcije organa (7). Među nekoliko tipova morfološki klasifikovanih RN, kao što su nekroptoza, parthanatos, tranzicija mitohondrijalne permeabilnosti i feroptoza, najsveobuhvatnije uspostavljena podrutina RN je nekroptoza (8). Nekroptoza je potvrđena 2005. godine kao mogući neapoptotički put ćelijske smrti izazvan TNFR1 (TNF-α receptor 1) u odsustvu intracelularne apoptotske signalizacije zavisne od kaspaze 8 (9). Nec-1 (nekrostatin 1) je otkriven u isto vreme kao specifični inhibitor nekroptoze malih molekula (9), praćen RIPK1 (kinaza 1 u interakciji sa receptorom) kao ćelijska meta Nec-1 (10, 11), što dovodi do značajnog napretka u razumevanju mehanizma nekroptoze (Tabela 1). Naknadna istraživanja su otkrila da multiproteinski kompleks nazvan „nekrozom“—kompleks RIPK1/RIPK3/MLKL (protein sličan domenu kinaze mešovite linije)—može efikasno da izazove nekroptozu kao odgovor na aktivaciju receptora smrti TNFR1 (12) ( Табела 1). Nekroptoza se primećuje u različitim bolesnim stanjima, kao što su moždani udar (13), infarkt miokarda (14), ishemijsko-reperfuziona povreda (IRI) (15) i druge inflamatorne bolesti (16), putem oslobađanja DAMP-a iz umirućih ćelija.

Feroptoza je novoopisani oblik RCD nezavisnog od kaspaze koji karakteriše ćelijska akumulacija reaktivnih vrsta kiseonika (ROS) izazvana peroksidacijom lipida zavisne od gvožđa (17), koja je indukovana erastinom i Ras sintetičkim smrtonosnim molekulom 3 (RSL3). Pošto je ćelijska membrana direktno oštećena smrtonosnom peroksidacijom lipida i naknadnom proizvodnjom ROS lipida, feroptoza pokazuje nekrotičan morfotip, a umiruće ćelije oslobađaju DAMP i imunogene metabolite (7, 18), što dovodi do patogeneze inflamatorne bolesti. Akumulirani dokazi su pokazali učešće feroptoze u eksperimentalnim modelima višestrukih ljudskih bolesti, uključujući akutnu povredu bubrega (19), neurodegeneraciju (20–22), IRI (23, 24) i Parkinsonovu bolest (21).

U ovom pregledu predstavljamo sve veći broj dokaza koji podržavaju uključenost nekroptoze i feroptoze u patogene procese različitih plućnih bolesti i rekapituliramo molekularni mehanizam nekroptoze i feroptoze u plućima. Razumevanje ćelijskog mehanizma kojim mali molekuli štite od RCD u plućima pomoći će u razvoju specifičnih terapijskih strategija usmerenih na različite oblike ćelijske smrti kod plućnih bolesti (Tabela 2).

Tabela 2. Uloga regulisane nekroze u patogenezi plućnih bolesti

Definicija skraćenica: 3T3 = 3-dnevni transfer, inokulum 3 × 10 5 ćelija COPD = hronična opstruktivna bolest pluća DAMP = molekularni obrazac povezan sa oštećenjem IPF = idiopatska plućna fibroza MEFs = mišji embrionalni fibroblasti N/A = nije dostupno RN Th2 = regulisana T nekroza -pomoćna ćelija tip 2.

Nekroptoza je oblik RN koji je dobio posebnu pažnju jer njegova inhibicija, uključujući genetsku modifikaciju RIPK1, RIPK3 i MLKL ili inhibitora malih molekula Nec-1, može regulisati progresiju bolesti na nekoliko modela miša (13–16). Nekroptoza se pokreće signaliziranjem različitih receptora smrti, kao što su TNFR, Toll-like receptor–Toll-IL-1 receptorski domen – koji sadrži IFN-β (TRIF) put koji indukuje adapter, TRAILR (receptor liganda koji indukuje apoptozu povezan sa TNF) , FAS (poznat kao CD95 i TNFRSF6 [član superfamilije TNF receptora 6]), put IFN receptor–RIPK1 i DNK zavisni aktivator puta IFN-regulatornih faktora (DAI) (7, 25–28) (Tabela 1) (Slika 1). Aktivacija RIPK je ključni korak u indukciji signalizacije nekroptoze. RIPK1 i RIPK3 su serin/treonin kinaze, i obe imaju homotipski interakcioni motiv proteina u interakciji sa receptorom (RHIM) u C-terminalnom domenu. RIPK1 se kombinuje sa RIPK3 preko RHIM domena, formirajući kompleks sličan amiloidu nazvan „nekrozom” (29). Sada se smatra da nekrozom sadrži četiri proteina: RIPK1, RIPK3, TRIF i DAI (30). Kao posledica formiranja nekrozoma, dolazi do fosforilacije RIPK3 na Ser345, što omogućava fosforilaciju MLKL (31). Fosforilacija MLKL izaziva formiranje oligomera vezivanjem za fosfatidilinozitol lipide i kardiolipin, što omogućava MLKL da se translocira iz citosola u plazma membrane i formira rupu u membrani. Ova svojstva narušavaju integritet plazma membrane, što dovodi do nekrotične smrti ćelija (32) (Slika 1). Pojavio se novi i zanimljiv mehanizam za regulisanje nekroptoze pri čemu E3 ubikvitin ligaza Parkina, poznata kao aktivator mitofagije, reguliše nekroptozu i upalu inhibicijom formiranja nekrozoma (33). Parkin aktiviran AMPK (AMP-aktivirana protein kinaza) sprečava formiranje kompleksa RIPK1-RIPK3 promovišući poliubikvitinaciju RIPK3. Parkin-nokaut miševi pokazuju povećanu upalu i spontano formiranje tumora putem aktivacije fosforilacije RIPK3 i nekroptoze (33) (Slika 1). Ovaj put AMPK-Parkin-RIPK3 je obećavajući regulatorni mehanizam nekroptoze, i stoga bi u bliskoj budućnosti trebalo sprovesti dalje eksperimente zasnovane na modelima upale pluća.

Слика 1. Učešće nekroptoze i feroptoze u bolestima pluća. U svakoj smrti ćelije, oslobađanje molekularnih obrazaca povezanih sa oštećenjem (DAMP) nakon rupture plazma membrane je uključeno u patogenezu bolesti pluća. Nekroptoza se pokreće signalizacijom različitih receptora smrti (npr. TNFR1, Toll-like receptora [TLRs] i INFR) i virusa. Ovi signalni receptori uključuju kompleks I (TRADD, RIPK1, cIAP i faktori povezani sa TNF receptorom [TRAFs]), TRIF i ZBP1/DNK zavisni aktivator IFN-regulatornih faktora (DAI). Signalizacija preko ovih receptora smrti izaziva formiranje kompleksa IIc nekrozoma fosforilisanim (p)-RIPK1, p-RIPK3 i p-MLKL. p-MLKL zatim formira oligomer i kreće se na površinu ćelije, izazivajući poremećaj plazma membrane. Neki molekuli povezani sa nekroptozom, kao što je kompleks RIPK1–RIPK3, izazivaju aktivaciju inflamasoma i obradu IL-1β, što dovodi do inflamatornih bolesti pluća. Erastin induktor feroptoze i Ras sintetički molekul smrtonosnosti 3 (RSL3) snižavaju os glutation (GSH)–glutation peroksidaze 4 (GPx4), što dovodi do peroksidacije fosfolipida (PL-OOH). Labilna akumulacija gvožđa izazvana TFR, DMT1 i feritinofagijom izaziva Fentonove reakcije, što rezultira proizvodnjom lipidnih reaktivnih vrsta kiseonika (ROS) i rupturom plazma membrane. Dim cigarete smanjuje aktivnost GPx4 i indukuje autofagičnu degradaciju feritina, što zajedno doprinosi labilnoj akumulaciji gvožđa i feroptozi. cIAP = ćelijski inhibitor proteina apoptoze DMT1 = transporter dvovalentnog metala 1 INFR = receptor interferona MLKL = protein sličan domenu kinaze mešovite linije NLRP3 = pirinski domen porodice NLR koji sadrži 3 PL-OH = netoksični lipidni alkohol RIPK = protein kinaza sa interakcijom sa receptorom TNFR1 = TNF receptor 1 TRADD = TNFR1-povezan protein domena smrti TRIF = TIR domen koji sadrži adapter indukovan IFN-β ZBP1 = Z-DNK-vezujući protein 1.

Feroptoza, kao i nekroptoza, je oblik nekrotične ćelijske smrti jer je snažno regulisana enzimima za popravku lipida, uključujući glutation (GSH) i glutation peroksidazu 4 (GPx4) (Tabela 1). Termin „feroptoza“ je skovan 2012. (17) da bi se definisao oblik ćelijske smrti izazvan malim molekulom erastinom u Ras-mutantnim ćelijama, koji potiskuje uvoz cistina, što dovodi do smanjenja GSH i smanjenja regulacije fosfolipidne peroksidaze GPx4 ( 34). GPx4 efikasno prebacuje toksične fosfolipidne hidroperokside u netoksične lipidne alkohole. Smanjenje regulacije GPx4 preko inhibicije GSH sa erastinom, ili direktno sa (1S,3R)-RSL3, dovodi do povećanja štetne peroksidacije lipida, što dovodi do indukcije ćelijske smrti. Tokom feroptoze, labilna akumulacija gvožđa izazvana poremećenim sistemom regulacije metabolizma gvožđa, kao što je receptor transferina i transporter dvovalentnog metala 1, izaziva Fentonovu reakciju, što dovodi do fosfolipidne peroksidacije plazma membrana izazvane ROS. Ove dve reprezentativne karakteristike feroptoze — poremećena homeostaza gvožđa i ubrzana peroksidacija lipida — povezane su sa različitim patologijama kod mnogih životinjskih vrsta tokom različitih faza života (Slika 1).

Novi dokazi sugerišu uključivanje i feroptoze i nekroptoze u različite eksperimentalne modele. Eksperimentalni model smrti neurona nakon hemoragičnog moždanog udara in vivo и in vitro pokazuje zajedničku feroptotičku i nekroptotsku smrt ćelija, ali ne apoptozu ili autofagiju zavisnu od kaspaze (35). Inhibicija mitohondrijalnog kompleksa I pokreće proizvodnju ROS-a zavisnu od mitofagije putem depolarizacije potencijala mitohondrijalne membrane, što dovodi do aktivacije kombinovane nekroptotske i feroptotske ćelijske smrti u ćelijama melanoma (36). Tretman 1-metil-4-fenilpiridija na ćelijskoj liniji humanog neuroblastoma (široko korišćen model Parkinsonove bolesti) navodno izaziva nekrotičnu i neapoptotičnu ćelijsku smrt, koja je osetljiva i na Nec-1 i na ferostatin 1 (Fer-1) (37 ). Pored toga, pokazali smo da je smrt epitelnih ćelija izazvana ekstraktom dima cigarete značajno inhibirana Fer-1, marginalno inhibirana tretmanom Nec-1 i inhibitorom pan-kaspase zVAD-FMK i značajno inhibirana Fer-1 (38). Nekoliko različitih puteva ćelijske smrti ili višestrukih puteva ćelijske smrti može se otkriti na osnovu tipa ćelije, vremenske tačke i pokretača ćelijske smrti. Zajedno, ovi nalazi ukazuju na moguću uključenost feroptoze i nekroptoze u zajedničku patogenezu bolesti, kao što su moždani udar, rak, neurodegenerativna bolest i hronična opstruktivna plućna bolest (HOBP).

Unakrsni razgovor između nekoliko puteva ćelijske smrti, uključujući feroptozu i nekroptozu, putem oslobađanja DAMP-a, predložen je u regulaciji inflamatornih bolesti (7).Pored toga, feroptoza posreduje u sinhronizovanoj ćelijskoj smrti koju reguliše Nec-1 i jedinjenja koja inhibiraju tranziciju mitohondrijalne permeabilnosti u modelu IRI i akutne povrede bubrega, izazivajući toksični imuni odgovor (39). Feroptoza i nekroptoza deluju kao alternativni putevi ćelijske smrti i naročito pokazuju sinergizam in vivo kod akutne ishemijske povrede bubrega (40). Potrebne su dalje studije da bi se razjasnilo da li je dvostruko ciljanje ovih puteva kombinovanim terapijama neophodno za efikasnu kliničku intervenciju.

Za razliku od apoptoze, RN je imunogeničniji zbog rupture plazma membrane i oslobađanja DAMP-a iz umirućih ćelija. DAMP su molekuli dobijeni od domaćina, uključujući ATP, HMGB1 (protein iz kutije 1 velike pokretljivosti), IL-33 i proteine ​​toplotnog šoka, pomoću kojih se imuni odgovor pokreće vezivanjem za receptore za prepoznavanje obrazaca, kao što su receptori slični Tollu ( 41). Oslobađanje DAMP-a je široko uključeno u različite inflamatorne bolesti pluća, kao što su akutna povreda pluća (42) i HOBP (43-45) (Slika 1). Shodno tome, DAMP bi potencijalno mogao postati uobičajena terapijska meta jer se nalaze nizvodno od puteva feroptoze i nekroptoze u zapaljenju pluća.

Autofagija je katabolički put posredovan lizozomima koji održava ćelijsku održivost i homeostazu eliminisanjem nepotrebnih i štetnih komponenti. Tokom procesa autofagije, intracelularni supstrati kao što su proteini, molekuli, lipidi i organele se izdvajaju u autofagozome sa dvostrukom membranom koji se naknadno razgrađuju nakon fuzije autofagozom-lizozom. Selektivna autofagija koja reciklira specifične komponente (npr. mitohondrije/mitofagija, feritin/feritinofagija i lipidi/lipofagija) je korišćena kao odgovor na različite ćelijske stresore. Povećanje autofagozoma se često pokazuje u umirućim ćelijama, što je morfološki klasifikovano kao programirana ćelijska smrt tipa 2 i nazvano „autofagična ćelijska smrt“. Ćelijska smrt se često javlja istovremeno sa autofagijom, a ne izazvana autofagijom (46). Stoga je ovaj termin promenjen u „ćelijska smrt zavisna od autofagije“ u prisustvu eksperimentalnih dokaza o mehaničkoj ili funkcionalnoj vezi između RCD i aparata za autofagiju. Štaviše, farmakološka ili genetska manipulacija autofagijom može modulirati ćelijsku smrt (47). Autofagna inhibicija promoviše ćelijsku smrt u različitim patološkim poremećajima, kao što su rak, kardiovaskularne bolesti i inflamatorni poremećaji, što ukazuje na citoprotektivnu sposobnost autofagije da održi vitalnost ćelije i homeostazu (48, 49). Nasuprot tome, pokazalo se da selektivna autofagija doprinosi RCD u različitim modelima. Selektivna degradacija Fap-1 (Fas-povezana fosfataza 1) autofagijom ubrzava FAS apoptozu na način specifičan za tip ćelije (50). Dim cigarete izaziva mitofagiju i autofagičnu degradaciju mitohondrija, doprinoseći nekroptozi kod HOBP (51). Feritinofagija, autofagična degradacija feritina do slobodnog gvožđa posredovana specifičnim adapterom NCOA4 (koaktivator nuklearnog receptora 4), doprinosi razvoju feroptoze putem peroksidacije lipida (52). GPx4, selenoprotein koji inhibira feroptozu deoksidacijom lipidnog ROS-a, smanjen je autofagnom degradacijom posredovanom šaperonom, što rezultira povećanom feroptozom (53). Zajedno, iako autofagija igra zaštitnu ulogu protiv ćelijske smrti održavajući ćelijsku metaboličku homeostazu u stabilnom stanju, čini se da autofagija selektivna na organele i proteine ​​izaziva RCD u različitim eksperimentalnim modelima, uključujući izlaganje dimu cigareta.

HOBP se karakteriše ireverzibilnim sužavanjem disajnih puteva i destrukcijom distalnog vazdušnog prostora kao rezultatom produžene izloženosti dimu, refraktorna je na trenutno dostupne terapije i sada je jedan od vodećih uzroka morbiditeta i mortaliteta širom sveta (54–56). Sve veći broj studija sugeriše da su nekrotični oblici RCD umešani u patogenezu HOBP. Nekroptoza epitelnih ćelija disajnih puteva putem mitofagije je uključena u patogenezu HOBP (51) (Tabela 2). U istom skupu studija, povećanje ekspresije RIPK3 primećeno je u plućima miševa divljeg tipa izloženih dimu cigareta. Druga grupa je takođe otkrila da izlaganje dimu cigareta izaziva nekrotičnu smrt ćelija i oslobađanje DAMP-a u ćelijskoj liniji BEAS2B. Štaviše, izloženost dimu cigareta kod miševa divljeg tipa povećava neutrofile i DAMP u BAL-u, koji je oslabljen tretmanom Nec-1 (43). Međutim, čini se da obe ove studije imaju potencijalna ograničenja jer im nedostaju eksperimenti sa miševima sa nokautom RIPK3 ili MLKL (glavni regulatori nekroptoze). Dakle, dalje in vivo potrebni su eksperimenti da bi se procenilo učešće nekroptoze u patogenezi HOBP.

Alternativno, ranije smo pokazali da feroptoza epitelnih ćelija pluća izazvana autofagnom degradacijom feritina igra važnu ulogu u stvaranju fenotipa HOBP (39). Labilna akumulacija gvožđa i povećana peroksidacija lipida su prikazani uz istovremenu nekrotičnu smrt ćelija tokom izlaganja dimu cigareta, što je pojačano smanjenjem GPx4 u in vivo и in vitro eksperimenti (39). Tretman deferoksaminom i eksperimenti sa srušenjem Fer-1 i GPx4 takođe podržavaju ulogu feroptoze u epitelnim ćelijama pluća tretiranim dimom cigareta. Feroptoza uzrokovana labilnom akumulacijom gvožđa u epitelnim ćelijama inicira se autofagnom degradacijom feritina (feritinofagijom) preko NCOA4 (koaktivator nuklearnih receptora 4) kao odgovor na tretman dimom cigareta (39). Štaviše, dim cigarete je izložen GPx4 +/− miševi pokazuju značajno veće stepene peroksidacije lipida, neapoptotičke ćelijske smrti, oslobađanja DAMP-a i pojačanih fenotipova HOBP od miševa divljeg tipa, koji su svi oslabljeni u GPx4-transgeni miševi (39). Ovi podaci ukazuju na važnu ulogu dima cigareta u feroptozi epitelnih ćelija u patogenezi HOBP. Prema tome, supresija peroksidacije lipida pomoću GPx4 i antioksidansa kao što je Fer-1 i helacije gvožđa deferoksaminom je moguća meta antiferoptotičkog tretmana za sprečavanje progresije HOBP.

Do danas, ne postoje uspešna klinička ispitivanja koja koriste antioksidantnu terapiju za HOBP. Nezasićeni lipidi dovode do konstantnog širenja autooksidacije slobodnih radikala zbog slabe veze ugljenik-vodonik u metilenskoj grupi. Dakle, ciljanje peroksidacije lipida je potencijalna antioksidativna terapija. To potkrepljuju naši podaci koji pokazuju da je i prisustvo GPx4 transgena i tretman sa Fer-1 spasio je fenotip HOBP. Naši podaci ukazuju da je neophodno razviti antioksidativne lekove specifične za lipide za lečenje HOBP.

Idiopatska plućna fibroza (IPF) je refraktorna i neumitno progresivna plućna fibrotična bolest koja se patološki karakteriše povredom plućnog epitela i naknadnom fibroblastičnom proliferacijom i taloženjem ekstracelularnog matriksa u plućnom parenhima (57, 58). Epitel pluća deluje kao prva barijera koja sprečava pristup nadahnutim spoljašnjim stimulansima. Destrukcija alveolarnih epitelnih ćelija (AEC) ili epitelnih ćelija disajnih puteva tokom povrede pluća dovodi do neregulisanog zarastanja rana, uključujući proinflamatorni odgovor na stres, što dovodi do diferencijacije miofibroblasta i aberantnog taloženja kolagena u intersticijumu pluća (58, 59). Apoptoza epitelnih ćelija koja se smatra glavnim oblikom RCD u patogenezi IPF prvi put je opisana 1996. godine (60). Postoji značajno veći broj TUNEL-pozitivnih bronhiolarnih epitelnih ćelija i AEC u plućima pacijenata sa IPF nego u normalnim plućima i plućima pacijenata sa HOBP (60) Tabela 2. Štaviše, put Fas–Fas liganda, novi induktor apoptoza je povećana u BAL i zamrznutim delovima pluća pacijenata sa IPF u poređenju sa onima kod zdravih kontrolnih subjekata, što ukazuje na učešće apoptoze u patogenezi IPF (61). Epitelne ćelije pluća se smatraju ključnim igračem u kontekstu apoptoze u patogenezi IPF (62). Međutim, mehanizmi pomoću kojih apoptotične epitelne ćelije doprinose fibrozi pluća su još uvek slabo shvaćeni. Nenapoptotička fragmentacija DNK je otkrivena TUNEL testom, što ukazuje da TUNEL-pozitivne ćelije uključuju ne samo apoptotičke ćelije već i nekrotične ćelije. Veruje se da su epitelno-mezenhimske interakcije važne u patogenezi IPF-a, kao što pokazuje AEC apoptoza/nekroza pored osnovnih miofibroblasta u plućima ljudskih pacijenata (63). U prethodnoj studiji, pokazalo se da sekrecija IL-1β iz senescentnih bronhijalnih epitelnih ćelija indukuje diferencijaciju miofibroblasta u fibroblastima (58). DAMP izlučeni odumiranjem nekrotičnih ćelija uključeni su u neke plućne bolesti (64, 65), što ukazuje na potencijalnu ulogu smrti nekrotičnih ćelija u IPF-u. Ranije smo otkrili da RIPK3 posredovana nekroptoza u AEC-ima igra ulogu u razvoju IPF-a putem oslobađanja DAMP-a (66) (Tabela 2). Imunohistohemija i Western blotting pokazuju da su nivoi ekspresije RIPK3 i p-MLKL značajno viši u plućima pacijenata sa IPF nego u plućima zdravih kontrolnih subjekata. AEC-ovi tretirani bleomicinom (BLM) izolovani od RIPK3-nokaut miševa pokazuju slabljenje ćelijske smrti sa smanjenom ekspresijom p-MLKL. RIPK3-nokaut miševi efikasno inhibiraju sekreciju DAMP izazvanu BLM-om, smrt ćelija i fibrozu pluća bez smanjenja nivoa ekspresije cepane kaspaze 3. Према in vitro eksperimentalni rezultati korišćenjem zVAD-fmk i Nec-1, i apoptoza i nekroptoza koegzistiraju u AEC-ovima tretiranim BLM. BLM injekcija u mišja pluća divljeg tipa izaziva podjednako i cepljenu kaspazu 3 – pozitivnu ćelijsku smrt koju efikasno inhibira zVAD-fmk i cepljenu kaspazu 3 – negativnu ćelijsku smrt koju efikasno inhibira Nec-1 u AEC, što sugeriše da oba apoptoza i nekroptoza su važni koraci tokom fibroze pluća izazvane BLM. Veruje se da ova dva RCD puta potiskuju jedan drugog, ali nekroptoza funkcioniše kao alternativa kada apoptoza zavisna od kaspaze odsutna (67). Međutim, s obzirom na to da je prethodno navedeno in vitro eksperiment pokazuje da zVAD-fmk i Nec-1 sinergistički potiskuju ćelijsku smrt, mi spekulišemo da istovremena blokada apoptoze i nekroptoze može biti obećavajuća meta za lečenje IPF.

Nekroptoza posredovana sa RIPK3 i naknadna aktivacija inflamasoma NLRP3 (receptor sličan domenu oligomerizacije koji vezuje nukleotide koji sadrži pirin domen 3) primećeni su kod novorođenih miševa sa povredom pluća izazvanom hipoksijom, koja je oslabljena genetskom delecijom u RIPK3 (68). Slično tome, prijavljen je doprinos nekroptoze posredovane RIPK3 i puteva inflamasoma u razvoju mišjeg modela akutne povrede pluća izazvanog LPS-om. GSK872, selektivni inhibitor RIPK3, značajno smanjuje LPS-indukovanu nekroptozu i aktivaciju NLRP inflamazoma, uz istovremenu atenuaciju proizvodnje IL-1β i IL-18 i infiltraciju inflamatornih ćelija (69). RIPK3- miševi sa nedostatkom zaštićeni su od povrede pluća izazvane ventilatorom na način koji zavisi od β-oksidacije masnih kiselina (70). Pokazalo se da inhibicija RIPK1 od strane Nec-1 smanjuje sistemsku i plućnu inflamaciju i povećava preživljavanje kod neonatalnih miševa sa sepsom (71). Dakle, ove studije sugerišu da nekroptoza i aktivacija inflamasoma doprinose različitim oblicima akutne povrede pluća.

Putevi ćelijske smrti, uključujući apoptozu i RN, evoluirali su kao odbrambeni sistem prve linije domaćina protiv supresora ćelijske smrti kodiranih virusom tokom virusne infekcije (72). Kao preliminarna faza za RN, apoptoza igra odbrambenu ulogu da eliminiše ćelije inficirane virusom, a zatim obezbeđuje adaptaciju za neke viruse da steknu supresore ćelijske smrti kodirane virusom. RN se smatra adaptacijom protiv supresora apoptoze ciljanih kaspazom 8 na način zavisan od RIP3 (72). Neki virusi, uključujući vakciniju, podložni su RIP3 zavisnom RN (73), dok drugi virusi, uključujući mišji citomegalovirus, više nisu podložni zbog supresora RIP3 kodiranih citomegalovirusom koji ograničavaju efikasnost puteva ćelijske smrti (74). Miševi sa nedostatkom RIPK3 aktivnosti su navodno podložniji infekciji gripom A od svojih kolega divljeg tipa (75). Dakle, preovlađujući konsenzus je da nekroptoza igra zaštitnu ulogu tokom virusne pneumonije tako što eliminiše inficirane ćelije, čime se smanjuje replikacija virusa (Tabela 2).

Što se tiče veze između RCD i bakterijskih infekcija, RIPK1, kaspaza 8 i RIPK3 doprinose Yersinia pestis Smrt ćelija makrofaga izazvana infekcijom, a miševi sa kaspazom 8 i RIPK3 su veoma podložni Y. pestis infekcija (76). Ovi nokaut modeli miša takođe smanjuju aktivnost inflamasoma povezanu sa kaspazom 1, što je ključno za odgovor domaćina na Y. pestis i druge infekcije (76). Ovi rezultati sugerišu da nekroza igra zaštitnu ulogu u urođenom imunitetu tokom bakterijskih infekcija. Isto tako, nekroptoza promoviše Staphylococcus aureus eliminacija suzbijanjem prekomerne inflamatorne signalizacije (77). Iako je nekoliko grupa ukazalo na štetnu ulogu nekroptoze tokom bakterijske infekcije (78), velika većina studija je ukazala na zaštitnu ulogu nekroptoze putem inhibicije bakterijskog opterećenja i upale.

Nasuprot tome, neka nedavna istraživanja su bacila svetlo na štetnu ulogu feroptoze u bakterijskoj infekciji i polimikrobnoj sepsi (79). Feroptozu ljudskih epitelnih ćelija inicira prokariotska bakterija Pseudomonas aeruginosa preko oksidacije fosfatidiletanolamina u membrani domaćina pomoću lipoksigenaze (pLoxA). У наставку, P. aeruginosa–indukovana feroptoza epitelnih ćelija domaćina promoviše formiranje biofilma, povećavajući kolonizaciju patogena (80). Slično, Мицобацтериум туберцулосис (Mtb) izaziva nekrozu makrofaga povezanu sa smanjenim koncentracijama GPx4 istovremeno sa povećanim slobodnim gvožđem, mitohondrijalnim superoksidom i peroksidacijom lipida, što su sve značajne karakteristike feroptoze. Zanimljivo je da tretman Fer-1 značajno smanjuje patologiju pluća, uključujući plućnu nekrozu i Mtb bakterijsko opterećenje, u Mtb-inficirani miševi (81). Štaviše, feroptoza se javlja u T ćelijama tokom infekcija koje reaguju na limfocite kao što je virus limfocitnog horiomeningitisa i Leishmania velika infekcija parazitima. GPx4, čistač fosfolipidnog hidroperoksida, sprečava feroptozu T-ćelija, koja igra ključnu ulogu u imunološkom odgovoru. Eksperimenti na miševima sa nedostatkom GPx4 za T ćelije otkrivaju da T ćelije sa nedostatkom GPx4 brzo akumuliraju lipidne perokside i umiru od feroptoze (82). T ćelije sa nedostatkom GPx4 ne uspevaju da spreče virusnu i parazitsku infekciju i spasavaju se izlaganjem visokim dozama vitamina E. Ovaj nalaz sugeriše štetnu ulogu feroptoze slabljenjem imuniteta T-ćelija i posledično sugeriše korisnu ulogu za vitamin E i GPx4 inhibiciju feroptoze tokom virusne i parazitske infekcije (82). Uzeto zajedno, da li je uloga RN u infektivnim bolestima zaštitna ili štetna može zavisiti od tipa ćelije i od vrste uključenih patogena (Tabela 2).

U 2013, Saddoughi i njegove kolege su prvi prijavili ulogu nekroptoze u inhibiciji rasta tumora pluća. U ovoj studiji, ciljanje onkoproteina I2PP2A/SET korišćenjem leka analognog sfingozina FTY720 potisnulo je rast tumora pluća putem aktivacije PP2A (protein fosfataze 2A) i nekroptoze posredovane RIPK1 (83) (Tabela 2). Akumulirani dokazi sugerišu da lekovi protiv raka izazivaju nekroptozu u ćelijama raka pluća. Cisplatin i paklitaksel i dalje igraju centralnu ulogu u hemoterapiji raka pluća. Paklitaksel indukuje nekroptozu u adenokarcinomu pluća, koju promoviše dasatinib, inhibitor c-Src, putem defosforilacije kaspaze 8 pomoću c-Src (84). Poznato je da dugotrajno lečenje cisplatinom povećava otpornost tumora na indukciju ćelijske smrti putem različitih mehanizama. Prekomerna ekspresija PDIA6 (protein disulfid izomeraze, porodica A, član 6) primećena je u ćelijama ne-malih ćelija karcinoma pluća (NSCLC) otpornim na cisplatin i u plućima pacijenata sa adenokarcinomom. PDIA6 ciljana siRNA preokreće fenotip otporan na cisplatin obnavljanjem nekanonskog puta ćelijske smrti koji se preklapa sa nekim putevima nekroptoze (85).

Uprkos sve većem broju studija koje izveštavaju o bliskoj vezi feroptoze sa progresijom različitih tumora, postoji mali broj materijala u vezi sa tumorima pluća. Alvarez i njegove kolege otkrili su mehanizam kojim se adenokarcinom pluća štiti od feroptoze. Biosintetički enzim klastera gvožđe-sumpor NFS1 koji leži u regionu genomske amplifikacije igra važnu ulogu u preživljavanju okruženja visokog kiseonika u ranom stadijumu tumora pluća. Supresija NFS1 sarađuje sa inhibicijom transporta cisteina da bi se pokrenula feroptoza i pomogla u postepenoj progresiji adenokarcinoma pluća (86) (Tabela 2). Zbog toga je adenokarcinom pluća visoko eksprimirao NFS1 da bi zaštitio od tekuće feroptoze kao odgovor na oksidativno oštećenje (81, 86). GPx4 je visoko eksprimiran u radiorezistentnim A549 i H460 ćelijama (NSCLC ćelijska linija). Erastin, reprezentativni induktor feroptoze, delimično potiskuje radiorezistenciju NSCLC ćelija indukujući GPx4 posredovanu feroptozu (87). Mreža duge nekodirajuće RNK i miRNA regulacije feroptoze je važan mehanizam u tumorigenezi NSCLC (88). Zajedno, ova zapažanja ukazuju na inhibitornu ulogu feroptoze u razvoju i progresiji karcinoma pluća (Tabela 2). Uprkos prisustvu in vitro izveštaji koji sugerišu klinički značaj RN ciljane terapije, the in vivo dokazi su oskudni. Stoga, dodatni dokazi uključujući in vivo potrebne su studije da bi se razjasnila uloga RN u humanom karcinomu pluća.

Nedavne studije ukazuju na učešće RN u patogenezi bronhijalne astme. Virusno indukovana egzacerbacija astme, koju oponašaju IFN-β-nokaut miševi tretirani grinjama kućne prašine, povezana je sa nekroptozom u smislu povećanih markera nekroptoze, pMLKL i laktat dehidrogenaze u BAL tečnosti (89). IL-33, glavni proinflamatorni citokin u imunom odgovoru tipa 2 kod inflamatornih bolesti, uključujući astmu, oslobađa se kao odgovor na nekroptozu, što dovodi do aktivacije bazofila i eozinofila (90). Štaviše, inhibitor nekroptoze GW806742X poništava nekroptozu i reakciju IL-33 in vitro i ublažava eozinofiliju u mišjem modelu Aspergillus fumigatus astma izazvana ekstraktom, koja je snažno zavisna od IL-33 (90). TNF-α-indukovana nekroptoza u ljudskim epitelnim ćelijama bronhija, koja delimično imitira tešku astmu, pojačana je srušenjem MUC1 (mucin 1), koji je oslabljen Nec-1 (91). Ista istraživačka grupa je predložila da otpor glukokortikoida protiv astme može zavisiti od blokirane nuklearne translokacije glukokortikoidnog receptora-α i fosforilacije p-p65 izazvane ablacijom MUC1 u TNF-α-indukovanoj nekroptozi u ćelijama bronhijalnog epitela (92). Poznato je da je fenotip bronhijalne astme heterogen u odnosu na dominaciju inflamacije T-pomoćnih ćelija tipa 2 (Th2).Čini se da je nekroptoza uključena u više aspekata astme, uključujući Th2 inflamaciju putem oslobađanja IL-33 iz nekrotičnih ćelija, kao i TNF-α-indukovanu upalu ne-Th2, koja se često primećuje kod astme otporne na steroide.

Što se tiče feroptoze u epitelnim ćelijama pluća, malo se zna o njenoj ulozi u patogenezi astme. Kompleks PEBP1 (fosfatidiletanolamin-vezujući protein 1)–15-lipoksigenaza (LO) kompleks, za koji se zna da stimuliše upalu Th2 izazvanu IL-13/IL-4, utvrđeno je da je glavni regulator feroptoze kao i GPx4. Viši stepen kolokalizacije PEBP1 sa 15-LO primećen je u ljudskim epitelnim ćelijama bronhija pacijenata sa astmom nego kod zdravih osoba. Pored toga, prijavljena je jaka korelacija između ove kolokalizacije kod astme i frakcionog izdahnutog azot-oksida u ljudskim epitelnim ćelijama bronhija, što ukazuje na važnost feroptoze izazvane PEBP1/15-LO u Th2 inflamaciji tokom patogeneze astme (93).

Ukratko, dokazi iz ovih istraživačkih studija sugerišu umešanost RN u alergijsku upalu disajnih puteva i pogoršanje astme. Terapijsko ciljanje nekroptotičke i feroptotske signalizacije može dovesti do budućeg razvoja u lečenju astme.

Što se tiče nekroptoze i feroptoze, uključeni signalni putevi i mehanizmi indukcije identifikovane RN su dobro dokumentovani zahvaljujući stalnom napretku u srodnim istraživanjima. Međutim, uloga RN u različitim plućnim bolestima ostaje nepotpuno shvaćena uprkos rastućim dokazima koji otkrivaju da je RN takođe umešan u nekoliko drugih bolesti organa. Pored toga, u poređenju sa nekroptozom, postoji manje dokaza koji podržavaju kliničku ulogu feroptoze u patogenezi bolesti pluća, što se najverovatnije može pripisati njenom nedavnom otkriću. Shodno tome, u budućnosti se očekuje akumulacija klinički relevantnih dokaza za feroptozu.

U ovom pregledu, pokušali smo da razjasnimo da RN igra kontradiktorne uloge – zaštitu od bolesti ili progresiju bolesti – u zavisnosti od tipa ćelije i patogeneze. Pored toga, neki in vivo ili in vitro eksperimentalni modeli ćelijske smrti su pokazali zajedničku ulogu u feroptotičkoj i nekroptotičkoj ćelijskoj smrti i sinergističkim efektima Nec-1 i Fer-1. Stoga bi bilo korisno dalje istražiti terapeutski potencijal istovremene inhibicije oba puta ćelijske smrti u složenim modelima bolesti. Verujemo da će nekroptoza i feroptoza postati nova meta za lečenje raznih plućnih bolesti koje trenutno nemaju lek.

Autori zahvaljuju Stephanie Cambier na komentarima na rukopis i promišljenim sugestijama.


Pogledajte video: Как повысить иммунитет? Витаминная смесь из грецких орехов и меда. Профилактика простуды и. (Јануар 2023).